O型\\A型\\Asia1型口蹄疫病由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，我公司的O型\\A型\\Asia1型口蹄疫病品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR檢測試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR檢測試劑盒
英文名稱：Serotype O,A and Asia 1 FMDV RT-PCR Kit
產品貨號：BTN11-1770
產品規格：50次

口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的多種偶蹄動物高度接觸性傳染病。口蹄疫病毒屬于小核糖核酸病毒科口蹄疫病毒屬，病毒基因組為單股正鏈RNA，約含8500個核苷酸。目前已知該病毒有7個血清型，分別為O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3，每種血清型包括多個亞型，各型之間無交叉保護。我國及周邊流行O型、A型和Asia1型3種血清的FMDV，對FMDV進行準確定型和遺傳變異分析，是FMD疫苗選擇和防控措施制定的重要依據。為此，本公司建立了一種能擴增O型、A型和Asia1型3種血清型FMDV的通用RT-nPCR方法，靈敏度高，特異性強。

產品特點：
1. 通用性強，可用于O型、A型和Asia1型3種血清型FMDV的定性鑒定檢測和分子流行病學調查。
2. 能對樣品中FMDV進行快速檢測，具有良好的特異性和敏感性。
3. 結合擴增產物的克隆測序技術，可對FMDV進行準確分型。
4. 使用一管式RT-PCR試劑盒，減少了操作步驟，降低了操作誤差。

產品組成：

組分	編號	規格
雙酶一管式RT-PCR Buffer，2×	BTN91202A	750 μL
MMLV-Taq Mix	BTN91202B	100 μL
即用型PCR Mix 3.0	BTN90805	1.5mL
通用FMDV專一性引物對一	yw13151316	100 μL
通用FMDV專一性引物對二	yw13171318	100 μL
通用FMDV陽性對照	yw13191320	50 μL
超純水	BTN100935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、樣品RNA的制備
用自選方法純化FMDV樣品的RNA，也可以另購本公司的一管式病毒RAN提取試劑盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取試劑盒，上述兩款產品跟本試劑盒兼容。

二、陽性對照
1. 為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。zuì好在專門的區域操作。

三、設置RT-nPCR反應
(一) 次RT-PCR：
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl體系)：

成 份	樣品	陽性對照	陰性對照
雙酶一管式RT-PCR Buffer，2×	15μl	15μl	15μl
通用FMDV專一性引物對一	2μl	2μl	2μl
樣品RNA	1-5μl	無	無
通用FMDV陽性對照	無	2μl	無
補超純水到	28μl	28μl	28μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl	2μl

4. 輕柔混勻后上機，按下面參數進行RT-PCR：

過程	溫度	時間
逆轉錄	60℃	30分鐘
預變性	95℃	5分鐘
PCR反應 (30個循環)	94℃	30s
	58℃	40s
	72℃	1分鐘
延伸	72℃	5分鐘

5. 電泳檢測RT-PCR產物。預期的PCR產物長度為1187 bp。
(二) 第二次PCR：
6. 在PCR管中加入下列成分(25μl體系)：

成 份	樣品	陽性對照	陰性對照
通用FMDV專一性引物對二	2μl	2μl	2μl
次RT-PCR產物	1-2uL	無	無
通用FMDV陽性對照	無	2μl	無
補超純水到	12.5μl	12.5μl	12.5uL
即用型PCR Mix 3.0	12.5uL	12.5uL	12.5uL

7. 輕柔混勻后上機，按下面參數進行PCR：

過程	溫度	時間
預變性	94℃	3分鐘
PCR反應 (30個循環)	94℃	30s
	58℃	40s
	65℃	1分鐘
延伸	65℃	5分鐘

8. 電泳檢測PCR產物。預期的PCR產物長度為996bp。

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本產品是基于實時熒光RT-PCR法的禽流感H5、H7、H9亞型快速檢測試劑盒。禽流感（Avian Influenza, AI）是由正粘病毒科中禽流感病毒（Avian Influenza Virus, AIV）引起的一種禽類的疾病綜合征。AIV基因組由8個負鏈股RNA片段組成,其血清亞型眾多，抗原變異性強，宿主范圍廣泛。禽流感H5、H7、H9亞型的致病性強，危害大。

產品特點：
1. 靈敏度高，可以達到50拷貝/μL，遠高于常規方法。
2. 可分別對禽流感病毒H5、H7和H9亞型進行定量測定。
3. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板，操作簡單，定量準確快速。

產品組成：

組分	編號	規格(50T)
2×RT MasterMix	BTN170403	0.5mL
2×qPCR Mix	BTN90408	1.1mL×2
H5專一性引物對	yw13211322	100 μL
H5 陽性對照，XXX 10E9拷貝/μL	yw13231324	50 μL
H7專一性引物對	yw13251326	100 μL
H7陽性對照，XXX 10E9拷貝/μL	yw13271328	50 μL
H9專一性引物對	yw13291330	100 μL
H9陽性對照，XXX 10E9拷貝/μL	yw13311332	50 μL
超純水	BTN100935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期一年。

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