通用型DNA純化回收試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多通用型DNA純化回收試劑盒等核酸電泳和回收產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括通用型DNA純化回收試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：通用型DNA純化回收試劑盒
英文名稱：Universal DNA Purification and Recovery Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：WH0040
產(chǎn)品規(guī)格：50次|200次

本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖體系和離心吸附柱，既可從TAE或TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA片段，又可用于直接純化PCR產(chǎn)物，能夠滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。溶膠液PC中含有pH指示劑，可根據(jù)顏色來(lái)判斷溶膠狀態(tài)。使用本產(chǎn)品可回收100 bp-8 kb大小的DNA片段，回收率可達(dá)80%。使用本試劑盒回收的DNA可直接用于連接、轉(zhuǎn)化、酶切、測(cè)序等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
·兼容性強(qiáng)：既可用作DNA產(chǎn)物直接純化，又可用作DNA凝膠回收。
·操作簡(jiǎn)便、可回收膠體積大：可按照膠塊與溶膠液等比進(jìn)行溶膠。
·穩(wěn)定、可靠：配有指示劑，可直觀判斷影響DNA吸附的pH值，又可保證DNA與膜充分結(jié)合，提高回收效率。

試劑盒組成：

組分	50T	200T
溶液PC	25ml	100ml
平衡液BL	30ml	120ml
漂洗液PW	15ml	50ml
洗脫緩沖液EB	15ml	30ml
吸附柱CB2	50個(gè)	200個(gè)
收集管（2ml)	50個(gè)	200個(gè)

保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min，以溶解沉淀。

注意事項(xiàng)：（請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1．平衡液BL的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫/潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響。使用前請(qǐng)先檢查平衡液BL是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
2．溶液PC含有pH指示劑，為黃色，指示pH≤7.5。

操作步驟：
使用前請(qǐng)先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

一、從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段
1．柱平衡步驟：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中）加入500μl平衡液BL，12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）
2．將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分）放入干凈的離心管中，稱取重量。
3．向膠塊中加入等倍體積溶液PC（如果凝膠重為0.1g，其體積可視為100 μl，則加入100 μl PC溶液），50℃水浴放置10min左右，其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。（若膠塊的體積過(guò)大，可事先將膠塊切成碎塊）。
  注意：對(duì)于回收<150 bp的小片段可將溶液PC的體積增加到3倍以提高回收率；膠塊完全溶解后zuì好將溶液溫度降至室溫再上柱，因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合DNA的能力較強(qiáng)。凝膠完全融解后應(yīng)呈現(xiàn)黃色，即可進(jìn)行后續(xù)操作。如果膠完全融解后溶液的顏色為桔紅色或紫色，請(qǐng)使用10 μl 3M乙酸鈉（pH 5.0）將溶液的顏色調(diào)為黃色后再進(jìn)行后續(xù)操作。（溶液PC中含有pH指示劑，當(dāng)pH≤7.5時(shí)溶液的顏色為黃色，此時(shí)DNA才能夠有效的與膜結(jié)合，當(dāng)pH值偏高時(shí)溶液的顏色變?yōu)榻奂t色和紫色，需要進(jìn)行調(diào)整。）
4．將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放入收集管中。
5．向吸附柱CB2中加入600 μl漂洗液PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放入收集管中。
  注意：如果回收的DNA是用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn)，例如平末端連接實(shí)驗(yàn)或直接測(cè)序，建議PW加入后靜置2-5 min再離心。
6．重復(fù)操作步驟5
7．將吸附柱CB2放入收集管中，12000rpm （~13400×g )離心2 min，盡量除去漂洗液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，徹底晾干。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR等）實(shí)驗(yàn)。
8．將吸附柱CB2放入一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量的洗脫緩沖液EB，（如果回收的目的片段>4 kb，則洗脫緩沖液EB應(yīng)置于65-70℃水浴預(yù)熱），室溫放置2 min。12000rpm （~13400×g )離心2 min，收集DNA溶液。
  注意：洗脫液的體積不應(yīng)少于30 μl，體積過(guò)少會(huì)影響回收的效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有較大影響。若后續(xù)做測(cè)序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g)離心2 min，將DNA溶液收集到離心管中。

二、從PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收DNA
1．柱平衡步驟：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中）加入500μl的平衡液BL，12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）
2．估計(jì)PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，向其中加入等倍體積溶液PC，充分混勻（無(wú)需去除石蠟油或礦物油）。
  注意：對(duì)于回收<150 bp的小片段可將溶液PC的體積增加到3倍以提高回收率；溶液混勻后應(yīng)呈現(xiàn)黃色，即可進(jìn)行后續(xù)操作。如果溶液的顏色為桔紅色或紫色，請(qǐng)使用10 μl 3M乙酸鈉（pH 5.0）將溶液的顏色調(diào)為黃色后再進(jìn)行后續(xù)操作。
3．將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），室溫放2 min，12000rpm （~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放入收集管中。
  注意：吸附柱容積為800 μl，若樣品體積大于800 μl可分批加入。
4．向吸附柱CB2中加入600 μl漂洗液PW （使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放入收集管中。
  注意：如果純化的DNA是用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn)，例如平末端連接實(shí)驗(yàn)或直接測(cè)序，建議PW加入后靜置2-5 min再離心。
5．重復(fù)操作步驟4.
6．將吸附柱CB2放回收集管中，12000rpm （~13400×g )離心2 min，盡量除去漂洗液。將吸附柱CB2置于室溫放置數(shù)分鐘，徹底地晾干。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR等）實(shí)驗(yàn)。
7．將吸附柱CB2放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量的洗脫緩沖液EB，（如果回收的目的片段>4 kb，則洗脫緩沖液EB應(yīng)置于65-70℃水浴預(yù)熱），室溫放置2 min。12000rpm （~13400×g )離心2 min收集DNA溶液。
  注意：洗脫液的體積不應(yīng)少于30 μl，體積過(guò)少會(huì)影響回收的效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有較大影響。若后續(xù)做測(cè)序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g)離心2 min，將DNA溶液收集到離心管中。

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