葉綠體蛋白提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優質的蛋白質研究產品，本制品用于科學研究，我公司的葉綠體蛋白提取試劑盒品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括葉綠體蛋白提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：葉綠體蛋白提取試劑盒
英文名稱：Chloroplast protein extraction kit
產品貨號：HR0159
產品規格：50T|100T

葉綠體是植物細胞所特有的能量轉換細胞器，光合作用就是在葉綠體中進行的,由于具有這一重要功能，所以葉綠體一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。
葉綠體蛋白提取試劑盒用簡便快速的方法可以從各種植物樣本中提取得到葉綠體總蛋白。
本試劑盒適用于提取新鮮植物樣本的葉綠體蛋白，用于凍存樣本的提取時由于凍存過程中大部分葉綠體會被破壞，葉綠體蛋白回收率較低。
本試劑盒含有的獨特配方能夠有效溶解葉綠體膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。
本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。
本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。
本試劑盒不含有EDTA，與金屬螯合層析等下游應用兼容。
本試劑盒采用非酶法提取，提取過程簡單方便，速度快，可在1小時內完成，而且少交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法較低。酶法提取制備的葉綠體總蛋白，回收率提高，蛋白純度高，保持天然活性，但是耗時較長。如果需要更加快捷的提取試劑盒，可以選擇非酶法的提取試劑盒，對提取速度沒有要求的話，可以選擇酶法提取試劑盒。
本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分，不可直接用于2D電泳，如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳，請使用我公司其他貨號的試劑盒。也可以將zuì后樣本除鹽后再用于2D電泳，用脫鹽柱脫鹽處理。

儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。
【注】
●蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃保存，開蓋使用后-20℃保存
●蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

注意事項：
●本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 移液器、吸頭 ●離心機及離心管 ● 100μm細胞篩
● 振蕩器、渦旋混勻器、Dounce勻漿器 ●冰箱，冰盒

使用方法：
1．提取液制備：
每200μl預冷的蛋白提取液C中加入1μl蛋白酶抑制劑，混勻后置冰上備用。
【注】：
● 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。
2．取200-500mg新鮮植物樣本葉片，洗凈擦干后去除葉梗和粗脈。用手術剪刀盡可能剪碎。
3．加入1ml-2ml試劑A，用組織攪碎機/勻漿機/Dounce勻漿器充分勻漿。
4．將勻漿液用100μm細胞篩過濾。
【注】：
● 沒有細胞篩的話，在4℃，稍微靜置，讓粗纖維，成團組織塊等沉降，或者以低于100g力條件下離心1分鐘，收集細胞上清，棄組織沉淀。
●有些含粘液較多的樣品可能難以吸取，可以將1ml吸頭尖稍微剪掉一點使用。
● 液體量較少細胞篩不好過濾時可以補加2ml PBS緩沖液后過濾。
5．將濾液在500g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。
6．將上清在800g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。
7．將上清3000g力離心10分鐘，棄上清，收集沉淀。
8．將沉淀用試劑B重懸。
9．將懸液3000g力離心10分鐘，棄上清，收集沉淀。
10．在沉淀中加入200-300μl葉綠體蛋白提取液C，充分混勻。
【注】：
● 每400μl蛋白提取液C加入2μl蛋白酶抑制劑混合物。
11．在4℃條件下振蕩20-45分鐘。
【注】：
●試劑C處理時間根據預實驗結果調整。至葉綠體充分裂解，離心后沉淀體積減少。
● 振蕩時用振蕩器/搖床的較低轉速，保持液體稍微晃動即可。
● 沒有振蕩條件也可不振蕩，稍微延長試劑C處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻。
12．在4℃，12000g條件下離心15分鐘。
13．將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到葉綠體總蛋白。
14．將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
【注】：
● 建議用BCA法進行蛋白定量。
●蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。

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名稱：植物總蛋白質微量提取試劑盒(SDS-PAGE專用)
貨號：BTN81218
規格：30次
本產品用于快速提取微量植物蛋白，用于SDS-PAGE凝膠電泳和Western印跡分析。

產品特點：
1.可以處理各種植物材料，包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡單。
3. 能有效去除植物樣品中常見的污染。

試劑盒組成：

成分	規格
溶液A	30ml
溶液B	240ml
溶液C	1.5ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1．稱取植物樣品。如果是冰凍干燥的樣品，稱取50mg。如果是新鮮組織樣品，稱取100mg。在液氮條件下，用研缽充分研磨成為粉末。
2．將研磨得到的粉末轉移到1.5mL的塑料離心管中。
3．加入1mL溶液A，在震蕩儀上充分震蕩5分鐘。
4．室溫12000g離心5分鐘，組織殘渣碎片將形成沉淀。
5．將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中，在沸水中處理3分鐘。
6．冷卻至室溫后，轉移到一個10-15mL塑料離心管中，加入8倍體積的-20℃預冷的溶液B。
7．顛倒混勻后，置于-20℃冰箱中至少60分鐘以充分沉淀其中的蛋白質。
8．12000g離心15分鐘，去上清液，保留蛋白沉淀。
9．室溫晾干之后，加入50μL溶液C并在震蕩儀上充分震蕩以讓蛋白沉淀充分溶解
10．將蛋白溶液在沸水中處理3分鐘。
11．室溫12000g離心5分鐘，上清可以直接用于蛋白濃度測定和SDS-PAGE。


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