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特別提示：包括1×電轉移緩沖液在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：1×電轉移緩沖液
產品貨號：KFS092
產品規格：1000ml

本產品作為蛋白電泳完畢后，將凝膠上蛋白電轉移到PVDF 膜或其它膜上的緩沖液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。本產品不含SDS，客戶可根據自身需求，自行添加0.1%的SDS。

儲存：4℃，有效期12個月。

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名稱：糖蛋白染色試劑盒
貨號：BTN131075
規格：10次
本產品為在SDS-PAGE凝膠或蛋白免疫印記硝酸纖維素膜上檢測糖蛋白的試劑盒。該方法使用三種試劑，所需時間僅需不到兩小時，而其他的染色方法需要四到五小時。染色后的糖蛋白為品紅色條帶，背景為淺粉色或者無色。

產品特點：
1．包括一種陽性對照蛋白及一種陰性對照蛋白。
2．簡潔、易儲存的試劑盒。
3．本產品足夠10張mini-PAGE膠或20張8×8cm蛋白免疫印記硝酸纖維素膜染色。

產品組成：

成分	規格
氧化試劑	2.5g
糖蛋白染色試劑	250ml
還原試劑	1.25g
陽性對照(辣根過氧化物酶)	1mg
陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑)	1mg
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

自備試劑：0.9%NaCl溶液或PBS緩沖液、BCA工作液。

使用方法：

實驗前準備
1．配制3%乙酸溶液：將30mL冰醋酸與970mL超純水混勻，室溫保存備用。
2．配制50%甲醇溶液：將250mL甲醇與250mL超純水混勻，室溫保存備用。
3．配制氧化試劑：向氧化試劑干粉中加入250mL的3%乙酸溶液，充分混勻溶解后得到氧化試劑溶液，室溫保存備用。
4．配制還原試劑：向還原試劑干粉中加入250mL的超純水，充分混勻溶解后得到還原試劑溶液，室溫保存備用。
5．配制陽性對照(辣根過氧化物酶)：向1mg固體中加入0.5mL超純水，使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80mm×80mm的凝膠來說，每個泳道加5到10μl的陽性對照。將配制好的陽性對照分裝后-20℃保存。
6．配制陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑)：向1mg固體中加入0.5mL超純水，使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80 mm×80 mm的凝膠來說，每個泳道加5到10μl的陰性對照。將配制好的陰性對照分裝后-20℃保存。
7．樣品稀釋：用SDS-PAGE上樣緩沖液將樣品濃度稀釋為1mg/mL，對于80mm×80mm的凝膠來說，每個泳道加5到10μl的樣品。

凝膠染色的操作步驟(注意:請在通風櫥中進行以下操作)
1．取出電泳后的SDS-PAGE凝膠，加入到100mL 50%甲醇溶液中，完全浸泡30分鐘后，倒出甲醇溶液。
2．用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊兩次，每次輕輕振蕩10分鐘。
 注：如有需要，此步的膠塊可在超純水中4℃過夜處理。
3．將膠塊轉移到25mL氧化試劑中，輕輕振蕩15分鐘。
4．用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊3次，每次輕輕振蕩5分鐘。
5．將膠塊轉移到25mL糖蛋白染色試劑中，輕輕振蕩15分鐘。
 注：若染色試劑中有晶體析出，只需離心取上清液去除晶體即可，不要加熱來溶解晶體。
6．將膠塊轉移到25mL還原試劑中，輕輕振蕩5分鐘。
7．用3%乙酸溶液洗滌膠塊，然后用超純水洗滌至顯色，糖蛋白將顯現為品紅條帶。膠塊保存在3%乙酸溶液中。

硝化纖維素膜染色的操作步驟(注意:請在通風櫥中進行以下操作)
1．用20mL 3%乙酸溶液洗滌膜兩次，每次輕輕振蕩10分鐘。
2．將膜轉移到10mL的氧化試劑中，輕輕振蕩15分鐘。
3．用10mL 3%乙酸溶液洗滌膜3次，每次輕輕振蕩5分鐘。
4．將膜轉移到10mL的糖蛋白染色試劑中，輕輕振蕩15分鐘。(注：若染色試劑中有晶體析出，只需離心取上清液去除晶體即可，不要加熱來溶解晶體。)
5．將膜轉移到10mL還原試劑中，輕輕振蕩5分鐘。
6．用3%乙酸溶液洗滌膜，然后用超純水洗滌至顯色，糖蛋白將顯現為品紅條帶。膜可保存在3%乙酸溶液中。

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