北京百奧萊博供應的EGR1-GFP報告基因質粒用于科研試驗，EGR1-GFP報告基因質粒是我司眾多優質報告基因檢測之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括EGR1-GFP報告基因質粒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：EGR1-GFP報告基因質粒
英文名稱：EGR1 GFP Reporter Plasmid
產品貨號：SY0181
產品規格：1μg

EGR1-GFP報告基因是用于檢測EGR1轉錄活性水平為目的的報告基因。早期生長反應基因1(early growth response gene 1 , EGR1) 為早期生長反應基因家族重要成員，其蛋白產物是一個59KD的鋅指樣轉錄因子。EGR1的目的基因是分化和有絲分裂所必須的。

EGR1-GFP報告基因主要檢測細胞中ERG1相關信號通路、藥物研究、基因過表達和RNAi的表型分析等。

pGMEGR1-GFP是我公司改造后的哺乳動物真核表達載體，在其多克隆位點插入了多個EGR1結合位點，可以地檢測EGR1的激活水平。由于載體采用了GFP作為報告基因，更便于后續的檢測。同時，對載體中預測出的其它轉錄因子以外的結合位點進行了適當的突變，增加了質粒的轉錄因子結合特異性。另外，由于質粒體積減小，使得EGR1-GFP報告基因更易于轉染。

質粒圖譜



pGM EGR1 -GFP質粒測序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用說明
pGMEGR1-GFP可以采用常規轉染方法轉染哺乳動物細胞。

注意事項
1）本質粒未經我公司允許不得用于任何商業用途，也不得移交給訂貨人實驗室以外的任何人或單位。
2）為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。

儲存條件：-20℃。

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貨號	名稱	規格
YT274	β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒	200次
SY0059	NF-κB螢火蟲熒光素酶報告基因質粒	1μg
SY0088	CREB-Luc報告基因質粒	1μg
SY0095	AhR-Luc熒光素酶報告基因質粒	1μg
SY0097	Pax6-Luc熒光素酶報告基因質粒	1μg
SY0098	p53-Luc熒光素酶報告基因質粒	1μg
SY0124	ELK1-Luc熒光素酶報告基因質粒	1μg

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名稱：螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒
貨號：SY0058
規格：100T|500T|1000T
報告基因檢測是現代分子生物學研究領域中分析結構基因旁側區域潛在的順式元件（如啟動子、增強子和沉默子等）和反式作用因子相互作用關系的一種重要工具。本螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒（Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit），是通過螢火蟲熒光素（luciferin）為底物來檢測螢火蟲熒光素酶。熒光素酶在 Mg2+和 O2 參與下催化熒光素氧化成oxyluciferin，在熒光素的氧化過程中，發出生物熒光（bioluminomescence），然后通過化學發光儀或液閃測定儀測定生物熒光。

產品特點
1）簡便，快捷。
2）靈敏度高，可檢測10-20 mol的熒光素酶。
3）安全，非放射性。
4）酶的濃度線性范圍可達8個數量級。

產品組份：

組分	100T	500T	1000T
細胞裂解液	60ml	60ml×5	60ml×10
螢火蟲熒光素酶檢測試劑	10ml	10ml×5	10ml×10

保存：未拆封試劑盒-20℃避光保存，有效期為 6 個月。-70℃避光保存，有效期為一年。試劑盒內螢火蟲熒光素酶檢測試劑（Firefly luciferase assay reagent）避光保存，不能反復凍融。

實驗步驟

1. 細胞裂解：
1）將轉入報告基因的細胞中的培養基移除，加PBS輕輕洗滌。按如下方案加入細胞裂解液（Cell lysis buffer），然后將培養板放在微型振蕩器上室溫振蕩15min，充分裂解細胞。

細胞培養板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
細胞裂解液（μl/孔）	30μl	60μl	120μl	250μl	500μl

【注】：裂解產物可室溫保存6h，4℃保存16h，-70℃可長期存放。（裂解產物不能多次反復凍融）。
2）將充分裂解后的裂解產物，10000-15000rpm離心3-5min。離心后將上清液移入新的EP管中進行后續檢測。
2.熒光素酶檢測：
1）按照儀器說明書要求將熒光測定儀打開，設定參數，測定時間為10s，測定間隔為2s。
2）將樣品按照20～100μl的體積（如果樣品量足夠，請加入100μl）加入測量管中（保持每次樣品的加樣量一致），另外加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑（Firefly luciferase assay reagent）混勻 2-3 次（不能漩渦混勻），充分混勻后測定RLU（Relative light unit），同時設置細胞裂解液（Cell lysis buffer）為對照孔。

注意事項
1）溫度會對酶的活性會產生影響，因此所有試劑應放置室溫后再使用。
2）如用單管熒光測定儀測定，每個樣品與測定試劑混合后到測定前的時間應保持一致。
3）螢火蟲熒光素酶催化的生物發光的zuì強發光波長為 560nm。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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