Caspase-10蛋白檢測(cè)試劑由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研試驗(yàn)，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要Caspase-10蛋白檢測(cè)試劑等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括Caspase-10蛋白檢測(cè)試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Caspase-10蛋白檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Caspase-10 Detection Assay(Western Blot)
產(chǎn)品貨號(hào)：KFS224
產(chǎn)品規(guī)格：50T

本試劑盒用于從哺乳動(dòng)物組織和培養(yǎng)細(xì)胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制劑及磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液LysisBuffer 勻漿裂解組織或細(xì)胞，作用溫和，提取過(guò)程簡(jiǎn)便。獲得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后續(xù)研究（本試劑盒包含兔抗Caspase-10抗體），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本試劑盒中包括這兩種酶的抑制劑。

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BTN91203 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 30次
BTN131045 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷(OTG) 5g
BTN81203 SDS-PAGE電泳液(干粉) 5L
BTN81205 一站式Tricine-SDS-PAGE套裝 30次
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名稱：考馬斯亮藍(lán)R250
貨號(hào)：YT950
規(guī)格：5g
本品是常用的蛋白染色劑。

分子式：C45H44N3O7S2Na
分子量：825.97

儲(chǔ)存條件：室溫。


名稱：甲叉-雙丙烯酰胺(粉劑)
貨號(hào)：SNM401
規(guī)格：100g

名稱：1.5 M×Tris Buffer緩沖液(pH8.8)
貨號(hào)：SNM404
規(guī)格：500ml

名稱：超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)
貨號(hào)：RFT047
規(guī)格：10T(50μl)
本產(chǎn)品包含2種多肽和3種低分子量蛋白質(zhì)組成，分子量范圍為3.3kD-45kD。可以用來(lái)判斷 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用說(shuō)明：
次收到該產(chǎn)品，室溫融化后，徹底混勻，離心快甩將溶液完全收集到管底，根據(jù)需要適量分裝成小管，-20℃貯存，每次取一小管使用；本產(chǎn)品每次使用前，要95℃加熱處理5分鐘。

一. 制膠：
I 配制分離膠
1．按照表一將不同體積的雙蒸水、40%PAA(19:1)、凝膠緩沖液和乙二醇加入到小燒杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混勻5-10秒，以使溶液充分混勻。
3．在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液，然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3 cm的水層，使凝膠表面保持平整。
4．靜置5-10分鐘，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。
表一 (一塊0.75mm mini膠用量)

	分離膠	濃縮膠
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×多肽電泳凝膠緩沖液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(電泳級(jí))	1.8 ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必須，不要使用1.0mm和1.5mm的凝膠，盡量使用厚度0.75mm的凝膠，這樣會(huì)減少電泳后染色和脫色的時(shí)間。
II 配制濃縮膠
去除覆蓋在分離膠上的水層，用濾紙將殘留的水吸去。
1．按照表一將不同體積的雙蒸水、40%PAA(29:1)和凝膠緩沖液加入到小燒杯中混合。
2．加入10%過(guò)硫酸銨和TEMED，立即混勻5-10秒，以使溶液充分混勻。
3．將梳子插入凝膠內(nèi)，避免產(chǎn)生氣泡。
4．靜置20-30分鐘裝待凝膠聚合

二. 電泳：
1. 取一管分裝好的Marker樣品，徹底融化，95℃加熱處理5分鐘，充分混勻后備用。
2. 電泳前，將10×Tris-Tricine-SDS電泳緩沖液用蒸餾水稀釋成1×緩沖液備用。將電泳槽的內(nèi)外槽加入1×緩沖液，輕柔拔出梳子，將Marker或蛋白樣品(樣品已經(jīng)過(guò)2×Tricine上樣緩沖液處理)加入點(diǎn)樣孔，根據(jù)表二條件進(jìn)行電泳，至藍(lán)色指示前沿至分離膠3/4位置時(shí)即可停止電泳。整個(gè)電泳過(guò)程大約需要2-3個(gè)小時(shí)。
注：如果電泳時(shí)間過(guò)短，染色時(shí)，指示前沿容易遮擋小于5kd的小肽。
表二 多肽電泳條件

恒電壓	150 V
起始電流	45-55 mA
結(jié)束電流	10-15 mA
電泳時(shí)間	2-3小時(shí)

三. 染色
根據(jù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行染色和觀察。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期12個(gè)月。

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