我公司致力于為客戶提供高純度、低成本的活性重組蛋白，包括100bp DNA Ladder在內的各類受體、細胞因子、生長因子、轉錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特別提示：包括100bp DNA Ladder ODD Plus在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：100bp DNA Ladder ODD Plus
產品貨號：JN0094
產品規格：500μl(100次)

  本DNA Marker為預混1×Loading Buffer的DNA溶液，可直接電泳。100bp DNA Ladder ODD Plus在100bp DNA Ladder ODD基礎上增加了2000bp和3000bp兩個條帶。

片段組成：
100bp，300bp，500bp，700bp（加亮），900bp，1100bp， 1500bp，2000bp，3000bp，其中500bp條帶濃度加倍，約為30 ng/μl，顯示為亮帶，使電泳結果更容易辨認，亦可用于定量。

儲存條件：-20℃，有效期2年。

圖1：DNA Marker電泳圖


圖2：DNA Marker條帶示意圖


表1：DNA Marker選擇指南

目的條帶分子量范圍 （推薦瓊脂糖%）	標準分辨率	高精分辨率
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose)	200bp DNA Ladder	100bp DNA Ladder
	200bp DNA Ladder Plus	100bp DNA Ladder Plus
	100bp DNA Ladder ODD	DNA Ladder 2000 Plus
	100bp DNA Ladder ODD Plus	DIY DNA Marker(條帶任選)
	DNA Ladder 2000
1500bp以上 (0.7% Agrose)	DNA Ladder 3000	1kb DNA Ladder I
	DNA Ladder 5000	1kb DNA Ladder II
	DNA Ladder 9000	1kb DNA Ladder Plus I
	DNA Ladder 10000	1kb DNA Ladder Plus II
	λ/Hind III DNA Marker	DIY DNA Marker(條帶任選)

表2：DNA Marker系列一覽表

DNA Marker	條帶組成(bp)	瓊脂糖(%)
100bp DNA Ladder	100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000	1.5%
100bp DNA Ladder Plus	100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000	1.0%
100bp DNA Ladder ODD	100、300、500、700、900、1100、1500	1.5%
100bp DNA Ladder ODD Plus	100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000	1.0%
200bp DNA Ladder	200、400、600、800、1000、1200、2000	1.5%
200bp DNA Ladder Plus	200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000	1.0%
DNA Ladder 2000	100、250、500、750、1000、2000	1.0%
DNA Ladder 2000 Plus	100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000	1.0%
DNA Ladder 3000	100、250、500、750、1000、1500、2000、3000	0.7%
DNA Ladder 5000	100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000	0.7%
DNA Ladder 9000	500、1000、2000、3000、5000、9000	0.7%
DNA Ladder 10000	500、1000、2000、4000、7000、10000	0.7%
1kb DNA Ladder I	500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000	0.7%
1kb DNA Ladder Plus I	100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000	0.7%
1kb DNA Ladder II	500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000	0.7%
1kb DNA Ladder Plus II	100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000	0.7%
λ/Hind III DNA Marker	125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130	0.6%
DIY DNA Marker(條帶任選)	100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24個fregment任選	詳情請參考說明書

根據您的關注的100bp DNA Ladder ODD Plus，您可能還對以下產品有需求：

貨號	名稱	規格
BTN90313	TBE電泳液，10×	250mL
BTN70503R	DNA marker(100-2000bp)	50次
BTN70503Y	DNA marker(100-5000bp)	50次
BTN120654F	Southern DNA Marker Oligo(DIG標記)	20次
BTN110801	核酸濃縮劑	30mL
YT418	DNA上樣緩沖液(6X)	2ml

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名稱：綠如藍核酸染料(UV)
貨號：BTN70303
規格：1.5mL
目前zuì常見的替代EB的核酸染料SYBR Green I(屬于花氰類染料)雖然毒性比EB低、靈敏度比EB高，但由于其化學穩定性差(怕光、怕水、怕熱)，實驗結果的重復性往往不盡人意；此外，SYBR Green I在電泳過程中能在DNA分子間移位，很容易使DNA 條帶模糊和扭曲，電泳清晰度和分辨率也不如EB。所以在實際應用中依然不能有效替代EB。本產品是同時具有EB 穩定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料

產品特點：
1.低毒。其主要成分未發現對人體有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保護使用者的健康和保護日益惡化的環境。
2. 靈敏。檢測靈敏度跟EB相當，能滿足常規核酸電泳實驗要求。
3. 穩定。對光、水和熱的穩定性跟EB相當，可加入瓊脂糖凝膠中反復熔化。
4. 無分子間位移現象。不會出現SYBR染料常見的條帶模糊和扭曲現象。
5. 使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中，也可以電泳后染色，還可用于PAGE。
6.跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景zuì低。
7. 觀察時不需要任何額外的儀器設備或UV光源，可以使用現成的觀察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈綠色)。
9. DNA或RNA濃度較高時還可以直接在日光下觀察(需要將膠放在黑色背景下)。由于避免了UV 對DNA的傷害，尤其適用于膠回收實驗。

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意:雖然本產品的主要成分未發現對人體有致癌性、未被列入有毒有害品，但操作時zuì好還是戴上塑料手套。

使用方法之一：電泳中染色DNA(RNA的染色跟DNA完全一樣)。
本方法是將DNAGREEN 直接加入溶化的凝膠中使用，只適用于瓊脂糖凝膠電泳，不適用于PAGE。
1. 將DNAGREEN 直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中，每100mL凝膠加3-10μl DNAGREEN，混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I，否則會相互干擾)。在100mL 瓊脂糖凝膠中加入DNAGREEN的量不要超過10μl，否則背景將很強。注意：一定要保證瓊脂糖徹底熔化，尤其是在次熔化膠的時候，否則未熔化的小顆粒將產生跟染料相同的熒光。
2. 將DNA樣品與DNA上樣液按比例混合后上樣。注意：一定要使用不含SDS等去污劑的上樣液，否則SDS 會跟染料結合，大地降低靈敏度。
3.上樣后電泳，電泳參數同常規的電泳。如果使用百奧萊博五分鐘核酸電泳液SuperBuffer-2，需要較高電壓，詳見該產品說明書。
4.電泳結束后在300nm左右的UV下觀察。注意：不要使用波長為260nm或360nm的UV，否則檢測靈敏度會降低。如果DNA或RNA濃度較高，還可以直接在日光下直接觀察(需要將膠放在黑色背景下)，避免UV 對DNA的傷害，尤其適用于膠回收實驗。
 注：顯色結果：在紫外下，DNA濃度非常高的時候是白色，濃度低的時候是綠色的，單鏈核酸有時是紅色的。
5. 用配置了520-550nm 濾光片(一般呈黃色或深黃色)的相機拍照。注意：不要使用與EB 兼容的紅色濾光片(它能阻擋520-550nm的光)。如果能再加上能濾去UV的濾光片，效果會更好。
6.后續 Southern、轉膜或DNA膠回收實驗按常規操作進行。

使用方法之二：電泳后染色DNA
本方法是在電泳后對DNA進行染色，適用于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE。但該方法需要單獨的染色處理，染料用量較大，不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色。
1. 按照常規方法進行電泳。
2. 用去離子水將DNAGREEN 稀釋500倍后(100mL 水需要加0.2mL DNAGREEN)，將凝膠放入，室溫下搖晃染色30分鐘(對瓊脂糖凝膠)或15分鐘(對PAGE)。
3. 用水脫色 10-30分鐘，具體時間需根據背景強弱決定，其余同方法一。
 注意：電泳后染色液可以反復使用次數。

疑難解答：
Q：本產品可否用于RNA染色？
A：可以，不論RNA是在甲醛變性膠中電泳，還是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE膠中電泳，RNA染色后在300nm下都跟DNA一樣呈綠色。
Q：本產品是否可以加入上樣液中進行染色？
A：不行，本產品只能直接加入凝膠中進行染色或電泳后再染色。
Q：為何前端(靠近正)的DNA 條帶很淡或根本看不見？
A：跟EB一樣，電泳時DNAGREEN 朝負方向移動，當前端的DNA(zuì小片段)進入沒有DNAGREEN的區域時，已經結合的染料分子會逐漸從DNA分子上脫落，所以條帶會變淡或根本看不見。解決辦法之一是縮短電泳時間或電泳后再染色；之二是在每100mL電泳緩沖液中補加3-5μL染料。
Q：本產品在哪種緩沖液中效果zuì好？
A：DNAGREEN染料在不同緩沖液中背景熒光強度不同，從弱到強的順序是：
 SuperBuffer-2、TBE、TAE。在背景較強的緩沖液體中，可以適當降低染料的用量，比如100mL膠中加3-5μl。zuì佳濃度需要稍做摸索。
Q: 為何電泳后前面部分(靠近正)的膠呈白色，后面的膠呈黑色？
A: DNAGREEN染料帶正電，電泳時往上走，膠的黑色部分是染料上移后留下的無染料膠。
 本產品在TAE中背景zuì強，可參考上個問題答案更換電泳液以降低背景值。
Q：用SYBR染色的DNA在電泳時為何容易發生條帶模糊和扭曲現象？
A：SYBR染料一般與DNA的小溝結合，但在常規電泳條件下該結合并不牢固，染料分子可以在標記的和未標記的DNA分子之間轉移，使DNA分子的泳動速度時快(無染料結合時)時慢(有染料結合時)，發生條帶模糊和扭曲現象。嵌入型染料(如EB和本產品)與DNA 結合牢固，則無此現象。
Q：核酸染料是否都有毒性？
A：核酸染料對動物和人的毒性由多方面決定。
 一是染料的膜通透性，EB 被歸類為強誘變劑是由于其分子量較小，容易進入細胞內。而EB 二聚體Ethidium Homodimer(EthD)嵌入DNA的能力比EB 強上千倍，但毒性很小，就是由于其分子比EB大，不能透過細胞膜，所以毒性反而更低。SYBR 系列染料雖然低毒，但由于一般都溶于DMSO(因為容易水解，不能使用水溶液做溶劑)中，所以如果濺到皮膚表面，更容易進入皮膚。
 二是染料是否容易被人體降解。比如EB在體外就很難降解，一旦進入體內能在人體內殘留的時間可能比較長，增加了毒性；而SYBR Green I等染料(也能以嵌入方式與DNA 結合)由于不穩定，比較容易自然降解，所以毒性自然較低。
 三是降解產物是否有毒性，比如用很多方法(如強堿法)降解EB 得到的產物有的比EB 毒性更大，而有的染料降解產物毒性卻低很多，甚至。
 四是染料進入細胞核以后是否能跟DNA 結合，很多實驗結果顯示即使EB染料也很難嵌入型到染色體中，因為染色體中的DNA 已經緊密地與各種組蛋白結合。
 五是細胞修復突變的能力，正常人體都有很強的修復突變的能力，如修復日光中UV 誘導的DNA突變。總之，一種DNA染料的毒性強弱是多種因素綜合的結果。

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