QN1032 DNA退火緩沖液(5X)

產品簡介
DNA退火緩沖液(5X)由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科學研究,我公司專注于克隆與表達產品的研發、生產和供應,為您提供的DNA退火緩沖液(5X)質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括DNA退火緩沖液(5X)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:DNA退火緩沖液(5X)
英文名稱:Annealing Buffer for DNA Oligos,5×
產品貨號:QN1032
產品規格:5ml
DNA退火緩沖液即DNA寡核苷酸退火緩沖液,該退火緩沖液不僅可以用于常規的DNA Oligo的退火,而且特別適合于較難退火的用于siRNA質粒構建的DNA Oligo的退火。使用DNA退火緩沖液(5×)可以有效避免DNA Oligo自身形成發夾結構,并且兩條Oligo退火后可以直接和經酶切純化的質粒連接。通常轉化后可以得到大量的陽性克隆。
使用本試劑操作非常簡單,只需把待退火的DNA Oligo和DNA退火緩沖液(5×)按照一定比例混合后,置于PCR儀上,約60分鐘即可完成。
儲存條件:-20℃,有效期至少12個月。
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名稱:DNA去磷酸化試劑盒
貨號:BTN130828
規格:20次
分子克隆時,載體的自連大降低了連接效率,而對載體DNA 兩個5′端的-PO4基團進行去磷酸化處理可以抑制自連反應。此外在進行DNA或RNA5′端標記前,也需要將其本來的-PO4基團去除再加上標記基團。本公司開發的DNA去磷酸化產品就是針對這一目的而開發。
產品特點:
1.基于細菌堿性磷酸酶,反應在較高溫度進行,效率更高。
2. 把DNA和RNA 5′端的-PO4基團變成-OH基團,喪失連接能力。
3. 模板可以是單鏈,也可以是雙鏈,既可以是DNA,也可以是RNA。
4.處理后的核酸純化后可以直接用于連接反應和標記反應。
5. 本產品足夠20次去磷酸化實驗。
試劑盒組成
| 成分 | 規格 |
| 10×去磷酸緩沖液 | 100μl |
| 細菌堿性磷酸酶(0.5U/μL) | 50μl |
| 超純水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期為6個月。
使用方法:
注意:dNTP和ATP 也是堿性磷酸酶的底物,所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP,一定要先將其去除。否則它們會耗掉大量的堿性磷酸酶,降低DNA 去磷酸化效率。
1、在微量離心管中配制下列反應液(50μL):
| 成分 | 用量 |
| DNA片段 | 不超過10pmol |
| 10×去磷酸緩沖液 | 5μl |
| 細菌堿性磷酸酶 | 2.5μl |
| 超純水到 | 50μl |
2、65℃反應30分鐘。如果是RNA樣品,建議在37℃反應30分鐘。
3、酚氯fǎng抽提去除酶活性,乙醇沉淀DNA 待用(見附)。
附:酚/氯fǎng抽提DNA、乙醇沉淀濃縮DNA(本試劑盒不提供相關試劑,需要從本公司另購相關試劑,下列操作僅供參考):
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超純水增加體積,以免純化過程中DNA 丟失。如果有必須,可以加入和4μL 核酸助沉劑提高回收效率。
2、加入100μL 酚/氯fǎng/異戊醇25:24:1 混合液震蕩半分鐘混勻,室溫12000g離心3分鐘,轉移上清到新離心管中。
3、重復上步操作一次。
4、加0.1倍體積(即10μL)的3 M 乙酸鈉溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍體積(即250μL)的無水乙醇。
6、混勻后12000g 4℃離心10分鐘,小心棄上清。
7、加入1mL 70%乙醇,短暫離心3分鐘后小心棄上清。
8、短暫離心5秒,吸棄殘留液體(約30-50μL)。
9、室溫放置2分鐘干燥后加入適量的超純水溶解DNA,立即使用或放-20℃長期保存。
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