QN2140 BL21pLysS感受態細胞

產品簡介
BL21pLysS感受態細胞的品牌是百奧萊博,是優質的克隆與表達產品,本制品用于科研試驗,我公司專注于克隆與表達產品的研發、生產和供應,為您提供的BL21pLysS感受態細胞質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括BL21(DE3)pLysS感受態細胞在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:BL21(DE3)pLysS感受態細胞
英文名稱:BL21(DE3)pLysS Competent Cells
產品貨號:QN2140
產品規格:10×100μl|20×100μl
本公司生產的BL21(DE3)pLysS感受態細胞是采用大腸桿菌BL21(DE3)pLysS菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達107,-70℃保存6個月轉化效率不發生改變。
基因型:F-,ompT,hsdSB(rB-mB-),dcm,gal(DE3),pLysS,Cmr
特點:該菌株帶有質粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。質粒pLysS含有表達T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達水平,但不干擾目的蛋白的表達。該菌適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。
儲存條件:-70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN140576 | pression/BTN140576.html" target="_blank">大腸桿菌DH10Bac化學感受態細胞 | 0.1mL*10 |
| BTN90801A | pression/BTN90801A.html" target="_blank">一站式TA克隆試劑盒 | 20次 |
| BTN120687 | pression/BTN120687.html" target="_blank">環孢霉素A | 1mL |
| BTN100838 | pression/BTN100838.html" target="_blank">遺傳霉素(G418)干粉 | 100mg |
| YT413 | pression/YT413.html" target="_blank">溶菌酶(>20KU/mg) | 0.5g |
| YT441 | pression/YT441.html" target="_blank">pUCm-T載體 | 20次 |
| YT455 | pression/YT455.html" target="_blank">STAT3熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
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名稱:酵母電轉感受態細胞制備液
貨號:BTN81201
規格:20次
本酵母電感受態細胞制備試劑是一種通過化學處理釀酒酵母和裂殖酵母電感受態細胞,使之不但馬上能用于電轉化,還能長期放置后用于電轉化。
產品特點:
1. 操作簡單,單溶液制備,除酵母培養的時間外,整個操作只需要10余分鐘。
2. 制備得到的感受態細胞可以-80℃保存一年,方便多次使用,免去每次轉化都要新鮮制備感受態細胞。
3. 主要用于釀酒酵母S.cerevisia和S.pombe,但能否用于其他酵母(如C.albicans、Pichia pastoris等)不詳。
4. zuì高轉化效率可達到0.2-1×106個轉化子/ug質粒DNA。
5. 得到的感受態細胞可以用各種線性或環狀酵母穿梭質粒DNA進行轉化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
6.可以用于酵母雙雜交、定點突變、基因破壞、等位突變基因修復等實驗。
7. 本試劑盒足夠處理200mL酵母菌液,制備40管酵母感受態細胞。
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑:
滅菌水,SD液體培養基(不含氨基酸的0.67% Bacto Yeast Nitrogen ba
使用方法:
一:電感受態細胞的制備
說明:按本方法制備1 管酵母電感受態細胞就需要OD600達到1.0的新鮮酵母培養液5mL,用戶需根據制備的酵母感受態細胞數量決定培養細胞的體積。下面操作只是以10mL酵母為例說明。
1.培養S.pombe細胞:挑取新鮮單菌落(4℃放置不超過3周的也可以),接種到10mL SD液體培養基中。30℃搖晃培養,搖床速度250rpm/分鐘,直到OD600達到1.0左右(相當于1×107細胞/mL)。
2.培養S.cerevisiae細胞:挑取新鮮單菌落(4℃放置不超過3周的也可以),接種到裝在10mL YPD液體培養基中。30℃搖晃培養,搖床速度250rpm/分鐘,直到OD600達到1.0左右(相當于1×107細胞/mL)。
3. 冰上放置15分鐘。
4.室溫1600rpm離心5 min,棄上清。
5. 用冰浴的滅菌水洗滌3次。
6. 用0.2mL冰浴的本產品重懸細胞。
7. 按每管0.1mL分裝到1.5-2mL的冷凍管中,直接放入-80℃冰箱待用。
注意:不能放在液氮中,否則將喪失電轉化能力。
二:電轉化酵母感受態細胞
1. 將裝有0.1mL感受態細胞的冷凍管從冰箱取出的、放置在30℃水浴中快速化凍(快速化凍的效果好于緩慢化凍)。
2. 用1mL冰浴的本產品洗滌一次。
3. 加入50μL冰浴的本產品重懸細胞。
4. 加入1-30 ng質粒DNA 并輕柔混勻。
5.轉移到預冷的、距離為0.2cm的電擊杯中。
6. 按電擊儀的手冊設置電擊參數并進行電擊處理,參考條件為:10kV/cm(對0.2 cm的電擊杯,則為2kV),5ms(25F,200)(各廠家儀器的使用略有不同,請嚴格按電擊儀廠家提供的手冊進行操作)。
7.電擊后將細胞轉移到1mL預冷的本產品中,輕柔混勻。
8. 取0.2mL轉化細胞涂盤(S.pombe細胞需涂盤在SD 固體培養基上,S.cerevisiae細胞需涂盤在YPD固體培養基上),30℃培養4-6天。
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