GL0413 軟骨染色液

產品簡介
北京百奧萊博供應的軟骨染色液用于科研目的,我公司的軟骨染色液品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括軟骨染色液(阿利新藍法,pH2.5)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:軟骨染色液(阿利新藍法,pH2.5)
產品貨號:GL0413
產品規格:2×50ml
用途:
軟骨染色,主要顯示羥基酸性粘液物質
注意事項:
主要由酸化液、Alcian 染色液(PH2.5)組成。染色結果為:酸性黏蛋白呈藍色,細胞核呈淺藍色。
儲存條件:4℃,避光,12個月
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名稱:高爾基體紅色熒光探針
貨號:KFS126
規格:100μg
高爾基體紅色熒光探針(BTR C5-神經酰胺)可以用來研究神經鞘脂類的運輸和代謝機制,也可以用來作為活細胞或固定細胞內高爾基體的選擇性染料。NBD染料對于環境敏感,在水中熒光信號微弱,但是在非質子溶劑和非性環境中熒光增強,Ex/Em=589nm/617nm。
儲存:-20℃,避光,有效期一年。
名稱:細胞膜染色試劑盒(PKH67)
貨號:HR8659
規格:500T
熒光染料PKH67 是一種可對活細胞進行熒光標記的染料,可以標記活體細胞,通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞。
PKH67對細胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,有著強而穩定的綠色熒光。經PKH67標記的細胞可用于體外和體內增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
在細胞分裂增殖過程中,PKH67 的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變為親代細胞的一半,通過流式細胞儀根據熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2 的熒光強度),二次(1/4 的熒光強度),三次(1/8 的熒光強度),以及更多分裂次數的細胞。PKH67 可檢測分裂次數多達六次甚至更多。
除了用于細胞增殖檢測,PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內示蹤,標記后熒光在胞內表達穩定,陽性標記率達98%以上,標記細胞形態良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況;或將標記的細胞注入體內,可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久,它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準確和更安全地得到想要的實驗數據。
PKH67標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。
PKH67標記細胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=490 nm,λem=502 nm。
儲存條件:-20℃避光保存。
【注】:
● PKH67熒光探針在2-8℃時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
●熒光染色劑為DMSO 溶液,冬季氣溫較低時為凝固狀態,易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短時間水浴。吸頭也需要放在培養箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
有效期:一年。
※ ※ ※ 使用前請仔細閱讀產品說明書 ※ ※ ※
使用限制:本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
產品更新:我公司會更新或升級產品,以優化和增強其使用性能,產品說明書會進行相應的版本更新。使用產品時,請參照隨產品附帶的說明書,不要參照網上下載的說明書,可能是不同的版本。需要zuì新電子版說明書時可以在收到產品后發郵件索取。
使用安全:使用時需要合適的實驗室外套,一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛,應立即用水沖洗。
注意事項:
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
● 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:
儀器:
● 流式細胞儀或熒光顯微鏡或激光共聚焦 ● CO2培養箱 ● 離心機 ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
試劑:
● PBS緩沖液(pH7.4,實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1×))
●或者HBSS(With:Calcium Magnesium Glucose;Without:Phenol Red。)
耗材:
● 離心管 ● 吸頭 ● 96孔培養板
使用方法:
使用注意事項:
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
●染色濃度根據細胞種類的不同和每孔內細胞數量的多少而異。
● 配制的PKH67母液易水解,建議分裝保存,分裝后用封口膜密封管口,再用錫箔紙包裹,zuì好和干燥劑一起用塑料袋密封,≦-20℃冷凍保存。
● PKH67 工作液應現配現用,不能提前配制,因為PKH67 吸水會分解,影響染色效果。
● PKH67 易被水解,在水溶液中會很快變質。母液請在使用過程中避免接觸水。工作液在標記細胞的過程中和水接觸是在許可的時間范圍內的。
● PKH67 溶解液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
● 不同的細胞種類標記后可以示蹤的代次或時間差異較大,請根據實際情況或參考文獻進行檢測。
1.試劑配制:
從冰箱中取出PKH67試劑,靜置幾分鐘至室溫,或者37℃水浴片刻后,離心盛放PKH67 的管子,開蓋前請務必離心幾分鐘讓試劑充分落入管底后才能開蓋。
2.根據需要檢測的細胞樣品數,用稀釋液將探針10倍稀釋,再用合適的溶液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)將PKH67母液25倍稀釋,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以不用試劑盒中的稀釋液,直接用HBSS 稀釋即可。
● zuì佳的工作液濃度請根據不同細胞和自身的實驗體系來調整。
● 一般細胞使用按試劑盒中的母液的終濃度250倍稀釋即可,有些細胞可能需要適當增加濃度。
3.將制備好的待測細胞用100μl染色工作液重懸,至細胞濃度大約107/ml。
【注】:
● 也可以進行原位染色,染色液足夠覆蓋細胞即可。
4.在2-8℃培養箱中孵育15-30 分鐘。
【注】:
● 建議待標記細胞在染色工作液中于37℃孵育5min,再于4℃孵育15min。
●低溫孵育可降低細胞對染料的內吞作用,有助于染料對質膜的標記,并且降低染料定位細胞質囊泡的可能性。
5.離心后去上清,收集細胞,用PBS或無血清培養基洗滌細胞1-2次,zuì后加入PBS或無血清培養基重懸細胞。
6.取500μl 細胞懸液,用流式細胞儀檢測。Ex/Em=490/502nm。
7.隨后還可按照細胞的正常培養方法進行培養。
可以在熒光顯微鏡下直接觀察標記效果,也可以在培養適當時間后再用流式細胞儀檢測細胞增殖,或用于其他特定實驗目的的細胞熒光示蹤。
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