北京百奧萊博供應的Myc熒光素酶報告基因質粒用于科研試驗，我公司專注于克隆與表達產品的研發、生產和供應，為您提供的Myc熒光素酶報告基因質粒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括Myc熒光素酶報告基因質粒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：Myc熒光素酶報告基因質粒
英文名稱：Myc-luc Reporter gene plasmid
產品貨號：YT450
產品規格：1μg

Myc報告基因質粒是用于檢測Myc轉錄活性水平的報告基因質粒。Myc質粒是以pGL6-TA質粒為模板，在其多克隆位點插入了多個Myc結合位點(E-box DNA binding element)，可以高靈敏度地檢測Myc的激活水平。Myc可以和Max形成異源二聚體，結合到E-box DNA binding element，啟動促進細胞增殖的基因轉錄。

pGL6-TA質粒是用于在哺乳動物細胞中進行螢火蟲螢光素酶報告基因檢測的新一代質粒。該報告基因質粒比Promega公司的pGL3系列有了的改進，一方面對于luciferase的編碼進行了改進，確保能更好地在哺乳動物細胞中進行表達，同時對整個質粒中所有可以被預測出的可能的轉錄因子結合位點全部進行了適當的突變處理，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉錄因子在質粒上的非特異性結合降到zuì低。

Myc質粒的主要信息如下：

base pairs	5647
Myc response element	26-61
Minimal TA promoter (pTA)	84-106
luc2 reporter gene	148-1800
SV40 late poly(A) signal	1835-2056
SV40 early enhancer/promoter	2104-2522
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2547-3341
Synthetic poly(A) signal	3366-3414
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3481-3500
ColE1-derived plasmid replication origin	3738
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4529-5389
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5494-5647
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5596-5615

Myc質粒的圖譜如下：


使用說明：
1. 次使用時請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. Myc質粒可以用常規的細胞轉染方法轉染細胞。檢測時可采用螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒(YT271)或雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒（YT273）。
3. 可以激活Myc的試劑，可以用作Myc報告基因檢測時的陽性對照。

儲存條件：-20℃。

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貨號	名稱	規格
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名稱：大腸桿菌DH5α化學感受態細胞
貨號：BTN81024
規格：0.1mL*10
 本產品是采用大腸桿菌DH5α菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。DH5α是一種常用于質粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因產物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現α互補，可用于藍白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。使用pUC19質粒檢測，轉化效率不低于107，適用于的質粒DNA克隆并能保證高拷貝質粒的穩定復制。
 本菌種來源于Hoffman-Berling 1100菌種。

基因型	表現型
deo R	組成型合成脫氧核糖
end A1	核酸內切酶I缺失
gyr A96	具有萘啶酮酸抗性
hsd R17	限制性酶EcoK缺失
△(lac)U169	lac基因缺失
rec A1	DNA重組活性降低
Rel A1	允許在無蛋白質合成時有RNA合成
sup E44	抑制琥珀突變突變，為某些噬菌體必需
thi-1	不能自身合成硫氨
φ80(lac ZΔM15)	提供α-互補所需的ω片斷

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl，可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1ng超螺旋質粒DNA所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入800μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，200rpm(小于225rpm)振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
注意事項：
1、涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。

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