超敏化學發光底物(A液+B液)是高品質的免疫檢測產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科學研究，本品質量穩定，價位合理，需要超敏化學發光底物(A液+B液)等免疫檢測產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括超敏化學發光底物(A液+B液)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：超敏化學發光底物(A液+B液)
產品貨號：ZN1944
產品規格：1盒

產品保存：4℃密封避光保存，一年有效
產品說明：Western blot 底物發光檢測試劑是一種高靈敏度的增強型化學發光底物試劑，采用獨特的發光底物系統，并對成份進行了優化。產品背景低，穩定性好，信號的靈敏度及強度高，發光時間持久。比普通 ECL 試劑敏感度高數十倍。用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶 HRP的抗體及其關聯的抗原?？梢造`敏地檢測出目的蛋白的存在。它由辣根過氧化物酶(HRP)催化發生化學反應，發出熒光，可對×光膠片曝光，也可直接進行 lμminometer 檢測或者熒光 CCD 掃描。
產品特點：
1．高信噪比，背景低。
2．發光迅速。
3．可在日光燈下進行發光操作。
4．靈敏度高：可檢測 femto 級抗原。
5．發光持續時間長，可進行反復曝光，進行結果優化，而不需重復 Western blot。
6．節約抗體，包括一抗二抗。超敏化學發光檢測試劑因靈敏度高，可使用較高抗體稀釋比例。一抗稀釋 1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/ml ；二抗稀釋 1:20000-1:100000或10-50ng/ μl。
使用方法：
1．執行常規 SDS－PAGE、轉膜和 Western Blot 步驟。
2．膜的封閉:用 TBS-T 液洗滌印跡膜 10minX2。放入 5%脫脂奶粉封閉液內，搖床震動，室溫封閉1小時。
3．一抗孵育：去除封閉液，并加入稀釋好的一抗，用搖床震動，室溫孵育2h或4℃孵育過夜。
注意：zuì好使用推薦的一抗稀釋比例，稀釋一抗使用封閉液稀釋。
4．用 4-6倍 TBS-T洗滌印跡膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次數可降低背景。
注意：洗滌之前，用 TBS-T洗液將印跡膜進行簡單的漂洗，將會增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：將一抗孵育后的印跡膜放入適當稀釋的HRP 標記的二抗中孵育，搖床震動，室溫孵育2 小時。
注意：zuì好使用推薦的HRP 標記二抗的稀釋比例，稀釋二抗使用封閉液稀釋。
6．重復第 4 步，以去除非特異性 HRP 標記二抗的結合。
注意：與 HRP 標記二抗孵育后，必須徹底地清洗印跡膜。
7．制備工作液：按每 1 ml 蒸餾水加 A 液和 B 液各 50μι，混勻組成作液即可使用。用量以充分覆蓋印跡膜為基準。每10cm2膜需要大約1ml工作液。
8．將印跡膜有蛋白的一面朝上平整的鋪在一張平板上，加上配好的發光底物工作液。
9．將印跡膜與工作液孵育1-5min。
注意：孵育的時間可以在暗室里觀察，以判斷是否進行膠片曝光。
10．將一潔凈的保鮮膜或透明的玻璃紙平整的鋪在孵育有工作液的印跡膜上，只要保鮮膜或透明的玻璃紙比較大可以不用吸除多余的工作液，輕輕趕出其間的氣泡。
11．在暗室中取一張×膠片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分鐘，立即顯影定影。
注意：根據其發光的強度,縮短或延長×片的曝光時間(對微弱信號，曝光時間可延長至數小時),或者曝光一系列不同的時間后再顯影定影挑選一張滿意的。也可用合適的照相器材直接記錄蛋白膜的化學發光圖像。工

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