BTN90707 動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒

動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域,動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)研究之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒
英文名稱:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
產(chǎn)品貨號(hào):BTN90707
產(chǎn)品規(guī)格:50次
本產(chǎn)品用于快速提取動(dòng)植物總蛋白,用于SDS-PAGE凝膠電泳和Western印跡分析以及蛋白活性測(cè)定等。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 提取過(guò)程十分簡(jiǎn)便,勻漿離心即可,整個(gè)過(guò)程只需要十幾分鐘。
2. 采用獨(dú)特的溫和裂解成分,蛋白保持天然活性。
3.適用于各種動(dòng)植物組織材料,包括新鮮或冰凍的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測(cè)定等下游實(shí)驗(yàn)。
5.一次可以處理100mg左右的樣品,足夠進(jìn)行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測(cè)。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A | 50ml |
| 5×SDS-PAGE上樣液 | 1ml |
| 說(shuō)明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,5×SDS-PAGE上樣液短期4℃保存,長(zhǎng)期可放-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
使用前,zuì好請(qǐng)?jiān)谌芤篈中加入自備的1M DTT溶液50μL。
一:勻漿法
注意:對(duì)致密的實(shí)體組織(如肌肉),zuì好用Polytron 式勻漿機(jī)勻漿處理。
1. 稱取動(dòng)物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉(zhuǎn)移到10-15mL的塑料離心管中。
2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式勻漿機(jī)勻漿,直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。為了避免產(chǎn)熱,可以分多次勻漿,其間放冰上讓勻漿液冷卻。
3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?br /> 5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測(cè)定蛋白濃度,請(qǐng)使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測(cè)定,否則溶液A中的成分會(huì)影響濃度側(cè)定)。如果要進(jìn)行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
二:直接研磨法
注意:可以使用玻璃和陶瓷的研缽,也可以使用與微量離心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 稱取動(dòng)物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的研缽或離心管中。
2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。
3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000g離心10分鐘,組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?br /> 5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測(cè)定蛋白濃度,請(qǐng)使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測(cè)定,否則溶液A中的成分會(huì)影響濃度側(cè)定)。如果要進(jìn)行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
三:液氮研磨法
注意:zuì好使用玻璃和陶瓷的研缽
1. 取大約100mg動(dòng)物或植物組織樣品,轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的研缽中。
2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解,然后將溶液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?br /> 5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測(cè)定蛋白濃度,請(qǐng)使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測(cè)定,否則溶液A中的成分會(huì)影響濃度側(cè)定)。如果要進(jìn)行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5× SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
注意事項(xiàng):
1.如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀,可以將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘,以去除可見的小碎片。
2.植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物,如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質(zhì),可以在zuì后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇,混勻后-20℃放置1小時(shí)或過(guò)夜,然后4℃,12000rpm離心10min,棄上清后室溫風(fēng)干,然后將樣品溶于自備的后續(xù)實(shí)驗(yàn)緩沖液中即可。經(jīng)過(guò)此純化處理后,部分蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變性,不能再用于活性檢測(cè)。
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