北京百奧萊博供應的小牛腸堿性磷酸酶用于科學研究，我公司專注于蛋白質研究產品的研發、生產和供應，為您提供的小牛腸堿性磷酸酶質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括小牛腸堿性磷酸酶在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：小牛腸堿性磷酸酶
英文名稱：Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
產品貨號：SY0388
產品規格：1000U

本品為小牛腸來源的堿性磷酸酶，可以降解幾乎所有磷酸單酯，但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase，中文名堿性磷酸酶，可將DNA、RNA的5’端磷酸基團去除，常用于阻止載體的自連作用：在分子克隆實驗中，DNA連接酶催化DNA連接時需要有磷酸基團的存在，載體在經酶切后會在切點端保留一個磷酸基團。而載體經堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無磷酸基團，因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應中載體本身會優先發生的連接反應被阻止，提高了目的片段插入率。另外，堿性磷酸酶還可制備用于5’端標記的DNA模板，以及用于該酶蛋白的脫磷酸作用等。

來源：攜帶小牛腸堿性磷酸酶表達質粒的酵母
質量控制（Quality Control）：無核酸外切酶、核酸內切酶、核糖核酸酶污染
熱滅活（Thermal Inactivation）：在螯合劑存在下，65℃加熱30min，99%活性不可逆喪失；使用苯酚，可使酶完全失活。
儲存液條件（Storage conditions）：10 mM Tris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
活性定義：在pH9.8, 37℃條件下，以對硝基苯酚磷酸鹽(p-nitrophenylphosphate)為底物，1分鐘生成1μmol硝基酚(p-nitrophenol)所用的堿性磷酸酶量定義為1個活力單位。
zuì佳pH（Optimal pH）：該酶在底物濃度高的情況下其zuì佳反應pH為10，在底物濃度低時，zuì佳pH為8，此時該酶活性較高濃度底物時稍低。
優化體系（Optimal Buffer）：AP Buffer (500 mM Tris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)
儲存條件：-20℃

使用方法:
1 DNA去磷酸化
① 在1.5ml離心管中加入下列試劑：
無菌ddH2O————Up to 50μl
DNA 片段*————1-20pmol
Alkaline Phosphatase————1-2μl
10×AP buffer————5μl
【*】：單鏈DNA或含5’端突出末端的DNA推薦低溫下孵育，平末端DNA或含3’突出末端的DNA建議在較高溫度下孵育。
② 混勻上述試劑，于37℃或50℃孵育30min?；蛘?7℃孵育15min后，再于50℃孵育15min。

2 酚氯fǎng法抽提DNA
① 苯酚/氯fǎng/異戊醇（25:24:1）抽提2次。
【注】：推薦在酚提取前將其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以徹底滅活堿性磷酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min，滅活效果更佳。
② 氯fǎng/異戊醇（24:1）抽提。

3 乙醇沉淀DNA
① 加入2.5μl 3M NaCl(終濃度150mM).
② 加入125μl（2.5倍體積）預冷乙醇，混勻后于-20℃放置30-60min，沉淀DNA。

4 溶解DNA
離心，徹底去除乙醇后，將DNA溶于適量去離子水（＜20μl）。

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名稱：過硫酸銨(APS)
貨號：YT625
規格：10g
本品用于配制PAGE膠等，通常先配制成10%的水溶液，然后再用于配制各種PAGE膠。10%過硫酸銨水溶液在室溫狀況下不太穩定，4℃可以保存3-5天，-20℃可以保存1-2個月。

分子式：(NH4)2S2O8
分子量：228.20
純度：＞98%

儲存條件：室溫。

名稱：植物蛋白提取試劑盒
貨號：WE0264
規格：25次|100次
  本試劑盒可從新鮮、冰凍或干燥植物組織中提取可溶性植物蛋白。適用于多種植物及植物的不同部位(如根、莖、葉、花、種子等)蛋白提取，提取植物蛋白，比傳統的方法提取蛋白產量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接進行蛋白電泳分析、免疫沉淀、Western Blot、蛋白活性測定及蛋白純化等實驗。所提蛋白可用BCA蛋白定量試劑盒(貨號：WE0276)進行濃度的測定。

試劑盒組成：

組份	25次	100次
Plant Protein Extraction Reagent	25ml	100ml
Protease Inhibitor Cocktail	250μl	1ml

保存條件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它組分：室溫

注意事項：
1、本品含有1mM EDTA。
2、為防止蛋白降解，所有的操作盡量在冰上進行。
3、使用本產品提取蛋白后，可采用BCA法進行蛋白定量。
4、為了獲得實驗zuì佳效果，請根據實驗調整zuì佳使用量。

使用方法：
1、請在蛋白抽提前取出實驗所需Plant Protein Extraction Reagent進行預冷。
2、稱量試驗植物組織的重量。按照1 g組織加入5ml Plant Protein Extraction Reagent(在蛋白抽提前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)。
注意：
1)勻漿前將大塊的植物組織剪成小塊，機械勻漿器勻漿10 s，間歇10 s，反復三次進行裂解，根據組織樣本不同選用適合的勻漿方式。
2)裂解液的使用量依據植物不同部位進行調整，若需要濃縮的蛋白提取物，可適當減少Plant Protein Extraction Reagent使用量。
3、勻漿后冰上孵育20-30分鐘。
4、4℃ ～13400×g，離心20分鐘。
5、收集上清中的可溶性蛋白，進行下一步的純化或下游分析。

儲存條件：-20℃

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貨號	名稱	規格
WE0320	封閉用正常山羊血清工作液(免疫組化封閉液)	10ml
SNM494	防脫載玻片(經APES處理)	50片
RFT041	蛋白Marker(66KD)	50mg
KFS233	TRAIL蛋白檢測試劑盒	50T
KFS237	p21蛋白檢測試劑盒	50T
JN0185	β-半乳糖苷酶ONPG定量檢測試劑盒	200T
QN1255	加拿大樹膠	100ml

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