WE0281 蛋白銀染試劑盒

蛋白銀染試劑盒的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品,本制品僅用于生物化學(xué)研究方面,我公司專(zhuān)注于蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng),為您提供的蛋白銀染試劑盒質(zhì)量可靠,批間差小,且價(jià)格公道,熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...
特別提示:包括蛋白銀染試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng):蛋白銀染試劑盒
英文名稱(chēng):Protein Silver Stain Kit
產(chǎn)品貨號(hào):WE0281
產(chǎn)品規(guī)格:20次
本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料,可應(yīng)用于變性膠及非變性膠的蛋白染色,具有目的條帶清晰、背景低,操作時(shí)間可靈活控制的優(yōu)點(diǎn)。另外,本試劑盒增加了一步短時(shí)敏化作用步驟,可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。
試劑盒組成:
| 組份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事項(xiàng):
1、請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備50ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脫液(10%乙醇)和50ml終止液(5%的冰醋酸)。
2、操作時(shí)請(qǐng)使用去離子水和潔凈的玻璃或塑料器皿,須戴一次性手套進(jìn)行操作。
3、整個(gè)銀染過(guò)程需在搖床上進(jìn)行,搖床轉(zhuǎn)速約60 rpm左右。
4、需自備乙醇,冰醋酸。
操作步驟:
以下操作步驟中各溶液的用量以大小為8.5×5.5 cm、厚度為1.0 mm的凝膠為例,以凝膠全部浸沒(méi)到溶液為準(zhǔn),置于搖床上操作,一般用量25ml。對(duì)于大型凝膠,各溶液的使用量需按凝膠體積的比列放大。
請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備好50ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脫液(10%乙醇)和50ml終止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:電泳完成后,用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
2、固定:用25ml固定液固定凝膠2次,每次固定15分鐘。
3、洗脫:用洗脫液洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
4、水洗:用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
5、增敏:將上一步洗好的凝膠置于銀染增敏工作液中,室溫下準(zhǔn)確孵育1分鐘后用超純水洗膠3次,每次洗滌20秒。
銀染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超純水中,混勻。
6、銀染:棄去超純水,將凝膠置于銀染工作液中孵育30分鐘。
銀染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混勻。
7、水洗:用超純水快速洗膠2次,每次洗滌準(zhǔn)確控制為20秒。
8、顯影:立即將洗好的凝膠浸沒(méi)在顯影液中,室溫孵育2-3分鐘,直至蛋白條帶顯示清晰。
顯影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混勻。
注意:顯影30秒內(nèi),蛋白條帶開(kāi)始顯現(xiàn),繼續(xù)顯影至2-3分鐘。若蛋白條帶顯色較淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)顯影時(shí)間至5分鐘及以上。
9、終止:用終止液洗去凝膠上的顯影液后,將凝膠浸泡在新的終止液中反應(yīng)10分鐘。
實(shí)驗(yàn)圖例

BSA蛋白樣品經(jīng)過(guò)10%的SDS-PAGE凝膠電泳后銀染結(jié)果
BSA蛋白分子量約為66 kD,上樣量從左到右分別為50ng,10ng,5ng
儲(chǔ)存條件:室溫。
根據(jù)您的關(guān)注的蛋白銀染試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱(chēng):3mL親和層析柱
貨號(hào):BTN140650
規(guī)格:3mL
本產(chǎn)品適用范圍廣泛,可用于純化分離重組蛋白、抗體和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA結(jié)合蛋白等生物大分子;還可以用于去除生物樣品中的內(nèi)毒素等污染。
親和層析是利用生物分子間所具有的專(zhuān)一親和力而發(fā)明的純化技術(shù)。它是利用生物分子間存在的特異性相互作用(如抗原-抗體、酶-底物或抑制劑、激素-受體等),通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中的一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。
親和層析柱常見(jiàn)的使用方法有重力法、手動(dòng)加壓法、蠕動(dòng)泵法,其示意圖如下:

儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
常用親和標(biāo)簽及純化方案:

名稱(chēng):超快蛋白銀染試劑盒
貨號(hào):BTN100810
規(guī)格:1000mL
核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與蛋白質(zhì)等大分子有機(jī)物形成穩(wěn)定的復(fù)合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把蛋白電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,其靈敏度比考馬斯亮藍(lán)高100倍。但常規(guī)的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實(shí)驗(yàn)。為解決此問(wèn)題,本公司推出本產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.超快,整個(gè)過(guò)程只需要不到60分鐘。
2.操作簡(jiǎn)單,只有固定(30分鐘)、染色(10分鐘)和顯影(10分鐘)三步。
3.靈敏度比考馬斯亮藍(lán)染色高100倍,能檢測(cè)到10ng的蛋白質(zhì)條帶。
4.三個(gè)成分中的兩個(gè)都是現(xiàn)用現(xiàn)配,可重復(fù)性好。
產(chǎn)品組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A組分一(干粉) | 2g |
| 溶液A組分二,10× | 100ml |
| 溶液A組分三,10× | 100ml |
| 溶液B組分一,10× | 100ml |
| 溶液B組分二 | 5ml |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
注:1000mL規(guī)格指可配制的溶液A(染色液)的體積,實(shí)際使用次數(shù)根據(jù)PAGE膠大小不同而不同。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
自備試劑:去離子水,乙醇和乙酸。
使用方法:
一、配制銀染固定液 100mL(對(duì)mini PAGE膠)
將40mL 無(wú)水乙醇、10mL 乙酸和50mL去離子水充分混合即可使用。
二、配制溶液A
需要配制的溶液A(染色液)的體積完全跟PAGE膠的大小相關(guān),一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。下面的用量是針對(duì)配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的體積不是100mL,則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分?jǐn)嚢杌靹蚣纯伞H芤篈需要新鮮配制。
| 成分 | 用量 |
| 去離子水 | 80ml |
| 溶液A成分一 | 0.2g |
| 溶液A成分二 | 10ml |
| 溶液A組分三 | 10ml |
三、配制溶液B
需要配制的溶液B(顯色液)的體積完全跟PAGE膠的大小相關(guān),一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。下面的用量是針對(duì)配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的體積不是100mL,則需按比例改變各成分用量。在一干凈燒杯中加入下列成分?jǐn)嚢杌靹蚣纯伞H芤築需要新鮮配制。
| 成分 | 用量 |
| 去離子水 | 89.5ml |
| 溶液B成分一 | 10ml |
| 溶液B組分二 | 0.5ml |
四、銀染
1.PAGE電泳或SDS-PAGE電泳結(jié)束后,將膠轉(zhuǎn)移到裝有100mL銀染固定液的瓷盤(pán)中,搖晃30分鐘以去除干擾銀染的成分(如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等)。注:此步很重要,否則銀染背景很高。
2.用100mL去離子水漂洗2次,每次2分鐘。
3.將PAGE膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)體積的溶液A中,使溶液A在輕柔搖晃過(guò)程中能夠淹沒(méi)PAGE膠。室溫?fù)u晃處理10分鐘。
4.倒掉溶液A,用100mL去離子水快速漂洗2次,每次半分鐘。
5.將PAGE膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)體積的溶液B中,使溶液B在輕柔搖晃過(guò)程中能夠淹沒(méi)PAGE膠。室溫?fù)u晃直到蛋白電泳條帶顯現(xiàn)(一般需要10分鐘左右)。
6.迅速將PAGE膠置于適當(dāng)背景下照相留存。膠的顏色肯能會(huì)逐漸加深,如果有必要保存膠,可以用自備的5%的乙酸終止顯色。

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