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產品詳情

BTN131134 Percoll

  • 產品/服務:BTN131134 Percoll
  • 型 號:BTN131134
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數:1047
產品簡介

Percoll由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學研究方面,我公司的Percoll品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...

產品詳細介紹

特別提示:包括Percoll在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!


產品名稱:Percoll
產品貨號:BTN131134
產品規格:250mL

Percoll是一種常用的低粘度的密度梯度介質,由直徑在15-30nm的硅膠顆粒組成,顆粒外包被了聚乙烯吡咯烷酮(PVP),為化學惰性,不會影響細胞的活性。

產品特點:
1.Percoll滲透壓很低(<20mosm/kg H2O),粘度也很小,可形成高達1.3g/ml 密度。
2.采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200~1000g)于數分至數十分鐘內達到滿意的細胞分離結果。
3.離心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度,可用于分離各種懸浮的細胞、線粒體、葉綠體和病毒(可小到70S)。
4.由于Percoll擴散常數低,所形成的梯度十分穩定。此外,Percoll不穿透生物膜,對細胞害,因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒,還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。
5.Percoll溶液高壓滅菌,必須進行不添加鹽或蔗糖。鹽的存在會引起percoll糊化,蔗糖的存在會引起焦糖化。

儲存條件:常溫運輸和保存,有效期五年(未開封狀態)。

使用方法:
1.不同濃度(密度)Percoll溶液的制備:先用9 份Percoll與1份 8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
Percoll濃度(%) 70 60 50 40 30 20
比重g/ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031

2.不連續密度梯度Percoll層的制備:先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預處理可使逐層疊加的Percoll液平穩沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll 比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3.裝樣:樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
4.離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層Percoll 之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩。
5.取樣:當所要分離的細胞大部分在兩層的界面時,可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll 層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌后可供培養或檢測用。

分離純化細胞舉例
1.富含NK活性大顆粒淋巴細胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五種不同密度的Percoll,如用10ml 試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2~1.5ml,初步從外周血中分離的PBMC細胞1×108懸于1ml培基中,按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK 殺傷活性的LGL細胞位于42.5%與45%Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。
2.純化淋巴母細胞和除去死細胞:分別疊加50%和30%Percoll液。收取經PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者),按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細胞為小淋巴細胞;兩層Percoll之間為淋巴母細胞,純度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死細胞。收獲淋巴母細胞可進行表型、結構以及功能的研究。

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貨號 名稱 規格
BTN131134 Percoll 250mL
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