KFS160 線粒體橙色熒光探針

線粒體橙色熒光探針的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品,本制品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要線粒體橙色熒光探針等探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品的客戶,請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
特別提示:包括線粒體橙色熒光探針在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:線粒體橙色熒光探針
英文名稱:MitoOrange
產(chǎn)品貨號(hào):KFS160
產(chǎn)品規(guī)格:100μL
具有細(xì)胞膜滲透性的MitoOrange(分子量427.4)探針包含一個(gè)溫和的巰基反應(yīng)性氯甲基基團(tuán),可用于標(biāo)記線粒體,并在固定之后保留在線粒體內(nèi)。標(biāo)記線粒體,細(xì)胞可以與MitoOrange 探針簡(jiǎn)單孵育,探針通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散傳過(guò)質(zhì)膜,并在有活性的線粒體內(nèi)富集。一旦線粒體被標(biāo)記,細(xì)胞再用醛基類固定劑固定之后,就可以進(jìn)一步做下游實(shí)驗(yàn)的深入處理。這些MitoOrange 染料可以解決一些致病性細(xì)胞上研究所面臨的困難,因?yàn)闃?biāo)記線粒體可以在細(xì)胞被固定之前開(kāi)展。
雖然傳統(tǒng)的熒光染料,如四甲基羅丹明和羅丹明123,很容易識(shí)別功能性線粒體,但是這些染料一旦在線粒體去化時(shí)也很容易被洗滌出線粒體。這些缺點(diǎn)限制了常規(guī)染色實(shí)驗(yàn)中所用的醛類固定劑,以及一些實(shí)驗(yàn)用的處理藥品的選擇。而MitoView 染料可以很好的解決這一問(wèn)題。
濃度:0.5mM in DMSO
儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期6個(gè)月
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貨號(hào):BTN100921
規(guī)格:25μL
本產(chǎn)品是濃度為0.35mM的DIG-11-dUTP。用于PCR、缺口平移、cDNA合成、隨機(jī)引物標(biāo)記和引物延伸等標(biāo)記DNA。
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸、-20℃保存、有效期一年。
名稱:生物素標(biāo)記dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
貨號(hào):BTN100920
規(guī)格:50μL
本產(chǎn)品是濃度為1mM的Biotin-11-dUTP。分子式:C28H41N6O17P3SNa3,分子量:927.6。分子結(jié)構(gòu)式圖如下:

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、隨機(jī)引物標(biāo)記和引物延伸等方法標(biāo)記DNA。
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期兩年。
名稱:超快DNA-RNA兩用轉(zhuǎn)膜試劑盒
貨號(hào):BTN121110
規(guī)格:5次
本試劑盒是基于毛細(xì)管轉(zhuǎn)膜法的Southern和Northern印跡膜制備試劑,專門用于從電泳得到的凝膠中制備用于Southern雜交和Northern雜交的印跡膜。其操作流程如下:

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.即開(kāi)即用,提供制備5張13×20cm大小的Southern雜交和Northern雜交印跡膜所需要的印跡膜和溶液,不需要用戶單獨(dú)準(zhǔn)備。
2.快速:轉(zhuǎn)膜過(guò)程只需要1小時(shí),整個(gè)過(guò)程只需要2.5小時(shí)(對(duì)DNA)或1.5小時(shí)(對(duì)RNA)。
3.跟硝酸纖維素膜、帶電尼龍膜、中性尼龍膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4.A型提供硝酸纖維素膜,適用于400bp以上的靶分子,背景低。B型提供帶電尼龍膜,適用于40bp以上的靶分子,結(jié)合力強(qiáng)。如需中性尼龍膜或PVDF膜,需另購(gòu)。
5.使用優(yōu)化的下向轉(zhuǎn)膜法,不但效率比上行轉(zhuǎn)膜法高30%左右,而且條帶彌散度低、分辨率高。
可用瓊脂糖膠(包括脈沖電泳膠,DNA電泳、RNA甲醛膠電泳和RNA戊二醛電泳)和DNA PAGE膠。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A | 660g |
| 溶液B | 100ml |
| 溶液C | 250ml |
| 硝酸纖維素膜13×20cm | 5張(僅A型提供) |
| 帶電尼龍膜13×20cm | 5張(僅B型提供) |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
使用方法:
一:Southern印跡膜的制備
1.按常規(guī)方法進(jìn)行電泳(包括脈沖電泳),本試劑盒不提供電泳所需試劑。如果進(jìn)行常規(guī)的Southern雜交,建議使用0.7%瓊脂糖進(jìn)行電泳,分離酶切的基因組DNA。電泳時(shí)zuì好加電泳分子量對(duì)照、酶切對(duì)照(先將標(biāo)記的全長(zhǎng)lambda DNA或探針質(zhì)粒與樣品DNA的混合,再酶切)、陰性樣品(不含檢測(cè)片段的DNA樣品)、雜交分子量對(duì)照(標(biāo)記的1.lambda/Hind III)等。電泳后和熒光標(biāo)尺并排拍照。
2.變性:次使用時(shí)需配制變性液2.5L(在3L的干凈玻璃燒杯中加入約2L自備的去離子水,攪拌緩慢中加入220g成分A和100mL溶液B,溶解后定容到2.5L后即可用),將凝膠轉(zhuǎn)移到一個(gè)至少10倍于膠體積的變性液中,脫色搖床上室溫下?lián)u晃處理60分鐘(如果使用帶正電尼龍膜,此步處理可以縮短到30分鐘)。未用完的變性液可放瓶中室溫保存。
3.轉(zhuǎn)膜:如果使用帶正點(diǎn)的尼龍膜,則直接用上步配制的變性液轉(zhuǎn)膜,如果使用中性尼龍膜和硝酸纖維素膜,則需配置轉(zhuǎn)膜液(在3L的干凈玻璃燒杯中加入約2L自備的去離子水,緩慢攪拌中加入440 g成分A和2mL溶液B,溶解后定容到2.5L后即可用)。將凝膠轉(zhuǎn)移到至少10倍于凝膠體積的轉(zhuǎn)膜液中,脫色搖床上室溫下?lián)u晃處理15分鐘。
4.測(cè)量凝膠的大小,然后借助尺子準(zhǔn)確切出一張印跡膜,每邊比凝膠大1mm,并切去一角,將印跡膜漂浮于去離子水上20分鐘確保全部濕潤(rùn),再按下圖設(shè)置下行轉(zhuǎn)膜體系(比上行轉(zhuǎn)膜體系效率高30%)。圖中membrane即印跡膜,transfer buffer即轉(zhuǎn)膜液,吸水濾紙厚度為2-3cm,一般按每cm2印跡膜需要1mL轉(zhuǎn)膜液的比例準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜液。對(duì)大的凝膠,可以同時(shí)使用兩張濾紙分別跟兩個(gè)容器的轉(zhuǎn)膜液連接以便使轉(zhuǎn)膜勻漿。

5.轉(zhuǎn)膜1小時(shí)。結(jié)束后用鉛筆標(biāo)記核酸結(jié)合面以免搞錯(cuò)。注意:不要過(guò)夜轉(zhuǎn)膜,否則信號(hào)將降低50%。
6.將印跡膜在中和液中處理10分鐘,中和液的用量至少為0.5mL/cm2印跡膜。
7.可將凝膠放入EB(0.5μg/mL)溶液中染色30分鐘后UV下觀察殘留核酸的量,反推轉(zhuǎn)膜效率。此步也可跳過(guò)。
8.將印跡膜夾在兩層濾紙中間80℃干燥15分鐘以固定核酸(不需真空),干燥時(shí)間不需延長(zhǎng),否則雜交信號(hào)可能會(huì)降低。
9.此時(shí)印跡膜可直接用于后續(xù)的核酸雜交實(shí)驗(yàn)或者在干燥狀態(tài)下保存待用(可放數(shù)月)。
二:Northern印跡膜的制備
10.按常規(guī)方法進(jìn)行電泳,本試劑盒不提供電泳所需試劑。本方法適用于甲醛變性膠和乙二醛變性膠,電泳后和熒光標(biāo)尺并排拍照。
凝膠不需要變性和中和處理(也不能變性,否則RNA將會(huì)降解),直接進(jìn)入轉(zhuǎn)膜步驟(同Southern印跡膜制備的第3到第9步)。
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