Hoechst 33342/PI由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品僅用于生物化學研究方面，我公司專注于細胞凋亡與增殖產品的研發、生產和供應，為您提供的Hoechst 33342/PI質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括Hoechst 33342/PI雙染試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
英文名稱：Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
產品貨號：SY0500
產品規格：100T

Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）雙染的方法以區分凋亡細胞和壞死細胞的試劑盒。其檢測原理是：細胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細胞膜，嵌入雙鏈DNA后釋放藍色熒光。對于正常細胞，其可少許進入細胞膜使其染上低藍色。而凋亡細胞由于細胞膜通透性增強，從而使得進入凋亡細胞內的Hoechst 33342明顯多于正常細胞，熒光強度比正常細胞要高。另外，細胞發生凋亡時染色質會固縮，從而使得染料能更有效和聚集的結合于DNA，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細胞外使其在細胞內的積累增加，這些特征都使得凋亡細胞經染色后熒光會比正常細胞明顯增強。但細胞核熒光染料PI不能穿透細胞膜完整的正常細胞或凋亡細胞，即活細胞對PI染料拒染。而對于壞死細胞，其細胞膜的完整性在早期即已喪失，可被PI染色。

經上述兩種染料雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光，壞死細胞為強紅色熒光＋弱藍色熒光。

本試劑盒染色快速方便，可用一步法或者兩步法進行染色。使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數量可達105-106個。

注意事項
1) Hoechst 33342、PI對人體有害，請注意適當防護；
2) Hoechst 33342、PI需避光，整個實驗過程盡量避光操作；
3) 熒光染料均存在淬滅情況，建議染色后需盡快檢測；
4) Hoechst 33342 與細胞孵育時間不宜過長，一般控制在20min以內。太長容易引起該染料的發射光譜由藍光向紅光遷移，導致紅色熒光和藍色熒光比例改變。
5) 如果用于組織樣品檢測，則必須把組織消化制備成單細胞懸浮液后才可以進行檢測。
6) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：-20℃，有效期12個月

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名稱：細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)
貨號：YT121
規格：50次
本試劑盒是目前zuì的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對細胞凋亡過程中產生的核小體間DNA鏈斷裂而設計的。可以非常有效地抽提zuì小片段為180-200bp的DNA ladder，同時又可以抽提到zuì大50kb左右的基因組DNA。本試劑盒可以抽提50個樣品。

DNA ladder也稱DNA fragmentation，是細胞凋亡的一個重要指標。通常觀察到DNA ladder，就可以判定細胞發生了凋亡。

樣品先被蛋白酶K消化，隨后加入適合DNA結合到純化柱上的緩沖液，然后加入到純化柱內。通過高速離心，使DNA在穿過純化柱的瞬間，結合到純化柱上，隨后通過兩次洗滌去除各種雜質，zuì后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個過程無需酚lǜ仿抽提，無需酒精沉淀，樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。

通過DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統的酚lǜ仿抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易損失。試劑盒提供了RNase A，可以獲得不含RNA的高純度總DNA，排除了RNA對DNA ladder觀察造成的干擾。

本試劑盒每次zuì多可以抽提20mg組織或200-350萬個培養細胞。樣品用量過多，反而會影響抽提效果。純化柱對于DNA的zuì大容量約為30微克。通常每200萬Hela細胞或500萬淋巴細胞可以抽提得到15-25微克總DNA，每25mg肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA，每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA，每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請勿超過純化柱的容量，樣品用量zuì好能保持在純化柱容量的70%或以下。當然過少的樣品也不利于檢測到DNA ladder。

對于培養細胞的凋亡檢測，通常6孔板一個孔的細胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測。

試劑盒組份：
樣品裂解液A——————10ml
樣品裂解液B——————11ml
洗滌液I——————21ml(次使用前加入7ml無水乙醇)
洗滌液II——————16ml (次使用前加入24ml無水乙醇)
洗脫液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA純化柱及廢液收集管——————50套

注意事項：
1. 溫度較低時樣品裂解液A或樣品裂解液B中可能會有沉淀產生，屬正常現象。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混勻后使用。
2. 次使用前洗滌液I需添加7ml無水乙醇，洗滌液II需添加24ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標記。
3. 本試劑盒需使用55℃或70℃水浴，請提前作好準備。
4. 除特別說明外，每次Vortex應控制在5-10秒左右。
5. 本試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。
6. 廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。

儲存條件：室溫，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)

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