DAPI染色液由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司專注于細胞凋亡與增殖產品的研發、生產和供應，為您提供的DAPI染色液質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括DAPI染色液在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：DAPI染色液
英文名稱：DAPI Staining Solution
產品貨號：YT891
產品規格：10ml|50ml

本品是經過精心優化幾乎適用于所有常見細胞和組織細胞核染色的染色液。本DAPI染色液可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。

DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和溴化乙錠相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。

DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。

DAPI的zuì大激發波長為340nm，zuì大發射波長為488nm；DAPI和雙鏈DNA結合后，zuì大激發波長為364nm，zuì大發射波長為454nm。

CAS：28718-90-3
英文名稱：dihydrochloride
分子式：C16H15N5·2HCl
分子量：350.25

注意事項：
1. 本DAPI染色液的濃度經過百奧萊博的優化，確保可以滿足各種常規染色的需要。如需使用特定濃度的DAPI，請選購百奧萊博的DAPI(YT890)。
2. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。抗熒光淬滅封片液(YT097)可以向百奧萊博訂購。

儲存條件：-20℃避光，有效期一年。

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名稱：XTT細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒
貨號：BTN140635
規格：500次
XTT能被活細胞里的線粒體脫氫酶降解而產生橙黃色水溶性的甲臜，通過測定甲臜的光譜吸收，進而可以測定細胞的增殖情況。XTT與MTT同屬四唑氮衍生物，它們檢測細胞活性的反應原理相似，原理圖如下：


產品特點：
1．盒靈敏度，可檢測低細胞密度樣品，檢測結果的重復性優于MTT。
2．操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時，無需洗滌或收獲細胞，免去溶解步驟。
3．無放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。
4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲基產物。

試劑盒組成：

成分	規格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存(但溶液B也可以常溫運輸和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是檢測細胞毒性的試驗，其他應用跟此類似或更簡單(如生長曲線試驗)，操作步驟可以以此為基礎稍作修改即可，故不再贅述。

㈠、接種細胞
1．按常規胰酶消化法消化匯合的單層細胞，收集到含血清的培養基中。
2．200g離心5分鐘收集細胞沉淀。
3．用培養基重懸細胞沉淀，制備成單細胞懸浮液并計數。
4．將細胞稀釋到2.5×103個/mL～5×10個/mL之間(需要根據細胞的生長速度決定)，如果不知道生長數度，一般可以稀釋到1×10個/mL。
5．將足夠量的細胞懸液轉移到培養皿中(便于用排槍取樣)。一個96孔板的MTT檢測需要約20mL的細胞懸液。
6．用排槍在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL細胞懸液(對正常細胞)。如果是腫瘤細胞，則加入100μL腫瘤細胞懸液和100μL培養基(總體積為200μL)。
 注意：一定要把細胞加在孔的正中，否則細胞會聚集在孔的角落處，影響試驗。
7．用排槍在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟細胞懸液等體積的培養基。第1 列各孔將作為+培養基-細胞+MTT對照(用于測OD時調零)，第12列加培養基的作用是減少邊緣效應對第11列反應的影響。
8．按常規細胞培養方法在37℃和5% CO2條件下孵育1-3天，使細胞進入指數生長期。

㈡、藥物處理
9．用培養基將藥物稀釋到8個待測濃度(如果不知道待測濃度，則需要預試驗確定)，一般一種藥物需要做3塊平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培養基(不要觸動細胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培養基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鮮培養基，這些孔將作為+培養基+細胞-藥物的對照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8個濃度梯度的待測藥物，每列加入一個濃度的藥物。
13．按常規方法把96孔板繼續放在37℃和5% CO2條件下孵育一定的時間，此段時間即為藥物處理細胞的時間，由用戶自己決定。
14．處理結束后去除第2到第11列(共10列，均含細胞)所有孔中的培養基，并再加入100μL新鮮培養基。
15．每天換培養使細胞數量擴增2-3倍(所需時間隨細胞不同而不同)。

㈢、存活細胞計數
16．在生長末期，去除第1到第11列各孔中的培養基后，再加入100μL新鮮培養基和10μL溶液A(含MTT成分)，用錫箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2條件下繼續培養4-8小時。
 注意：溶液A在低溫情況下會凝固，使用前請室溫放置或20-25℃水浴至全部溶解，搖勻后使用。MTT有致癌性，一定要帶手套操作。
17．小心吸棄孔內培養基(含溶液A)。由于培養基可能會影響光吸收，zuì好盡可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置搖床上低速振蕩10分鐘，使MTT形成的formazan結晶物充分溶解。
19．由于產物不穩定，故需要立即在酶聯免疫檢測儀上選擇490nm測定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培養基-細胞+MTT對照)調零。
20．計數同樣處理的各次重復的平均值。
21．以藥物濃度為橫軸，以吸光度為縱軸繪制曲線。由于各處理吸光度值差別很大，一般需將其轉化成生長抑制率(以不加藥物的第2和第11列各孔數據的平均數作為)，這樣便于計算出IC50，用于各種藥物處理效果的比較。
 注意：如果測生長曲線，則以時間為橫軸。正常生長曲線一般呈現S型，具有促進作用的則斜率加大。

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