SV0332 EciI限制性內切酶

產品簡介
EciI限制性內切酶由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,我公司的EciI限制性內切酶品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括EciI限制性內切酶在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:EciI限制性內切酶
英文名稱:EciI Restriction Endonuclease
產品貨號:SV0332
產品規格:500U|100U
在不同反應緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1:
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶。
反應條件:
CutSmart 緩沖液,37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
2,000units/ml。
甲基化敏感性:
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
注意事項:
建議溫育時間不超過 4 小時。
延時酶切條件下可能出現星號活性。
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名稱:Klenow片段(3′→5′exo-)
貨號:BTN131235
規格:200U
Klenow片段是大腸桿菌DNA聚合酶I的蛋白水解產物。它保留了DNA聚合酶活性,具有3′→5′外切酶活性,但不具有5′→3′外切核酸酶活性??梢栽贒NA模板和引物存在的條件下,選擇性地催化底物dNTP沿5′→3′方向合成與模板互補的DNA。本產品是重組表達得到。
產品用途:
1.雙鏈DNA 5′突出末端的平滑化。
2.用隨機引物制備探針。
3.隨機引物標記法。
4.寡核苷酸定向誘變中雙鏈DNA的合成。
5.雙脫氧法DNA序列測定(Sanger法)。
產品組成:
| 成分 | 規格 |
| Klenow片段(5U/μL) | 20μl |
| 10×Klenow Fragment Buffer | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
活性定義:以合成的Poly d(A-T)DNA為模板/引物,在37℃、pH7.4的條件下,30分鐘內使10nmol的全核苷酸摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。
使用舉例:(隨機引物的同位素標記反應)
1.在微量離心管中配制下列反應液
| 成份 | 用量 |
| 模板DNA | 25ng |
| 隨機引物(6-9mer)(1nmol/μl) | 2μL |
| 補超純水到 | 14μL |
2.95℃保溫3分鐘。然后冰中急冷5分鐘。
3.加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4.加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5.加入5μl 111TBq/mmol[α-32P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq,50μCi)
6.加入1μl本產品,反應液共25μl。
7.37℃反應3小時。
8.65℃加熱5分鐘。
反應液可直接作為探針使用。如有必要,可以通過用我司柱式探針純化試劑盒除去未反應的標記的dCTP。
注意事項:
1.本酶有高度穩定性,稀釋時不失活,但劇烈攪拌會失活。
2.由于不含有 5′→3′的外切核酸酶活性,因此沒有切口平移活性。
3.可用于雙鏈DNA末端以及缺口的修復。
4.與T4 DNA Polymerase相比,對模板結構的抵抗性能較好。
5.由于對DNA的親和性較強,過量使用易發生凝集作用從而抑制反應進行。
6.若用于5′突出末端的修飾時,補平后有時會多加一個堿基。
7.與DNA Polymerase I相同,ddNTPs的摻入不受底物抑制。
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