細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研目的，細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞凋亡與增殖之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)
產(chǎn)品貨號：ZN1526
產(chǎn)品規(guī)格：20T

保存條件：-20℃冰凍保存一年。
工作原理：
在機(jī)體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地gāo辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位，可以通過生物標(biāo)記的抗地gāo辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合鏈酶親和素-熒光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化，在 520-530nm 發(fā)射熒光，呈黃綠色。凋亡的細(xì)包核呈黃綠色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。
試劑盒內(nèi)容：
1．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml
2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3．DIG-dUTP(×20)20μl
4．封閉液(Blocking Reagent)4ml
5．生物素化抗地gāo辛抗體(× 100)20μl
6．SABC-FITC(× 100)20μl
7．Proteinase K(×200)50μl
8．抗體稀釋液 4ml
陽性對照片2張
用戶自備試劑：
1．多聚賴氨酸或APES。
2．0.01M TBS,PH7.5(配法:1L 雙蒸餾水中加入 8.5 克氯化鈉,1.2 克 Tris和 0.45—0.5ml 純乙酸。)
3．DAPI 染色液
4．水溶性封片劑或抗熒光衰減封片劑。
操作步驟：
1．樣品處理
(1)玻片預(yù)先用多聚賴氨酸或APES 進(jìn)行處理。
(2)細(xì)胞涂片和冰凍切片：zuì重要的是及時固定。用 4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)室溫下固定 30—60分鐘。0.01M PBS洗2分鐘×2次。蒸餾水洗滌 2分鐘×2次。
(3)組織：有條件時應(yīng)及時固定。常規(guī) 4%多聚甲醛/0.01M PBS(PH7.0---7.6)或10%中性緩沖福爾馬林固定 4 小時以上，石蠟包埋。切片常規(guī)脫蠟入水(脫蠟務(wù)必干凈)。
2．標(biāo)本片加 0.01M TBS 1:200 新鮮稀釋 Proteinase K 37℃消化 1—15分鐘,0.01M TBS洗2分鐘×3次。(細(xì)胞涂片和冰凍切片一般不消化或消化 10—60秒鐘。新鮮石蠟切片消化 5-10分鐘。陳舊石蠟切片消化 10-15分鐘)。
3．標(biāo)本片加標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)20μl/片,以保持切片濕潤。按每張切片取 TdT和 DIG-d-UTP 各 1μl，加入 18μl標(biāo)記緩沖液中，混勻。甩去切片上多余液體后加標(biāo)記液，20μl/片。置樣品于濕盒中，37℃標(biāo)記2 小時。
4．0.01M TBS洗2分鐘×3次。
5．加封閉液 50μl/片，室溫 30分鐘，甩掉封閉液，不洗。
6．用抗體稀釋液 1：100 稀釋生物素化抗地gāo辛抗體：(取1ml抗體稀釋液加生物素化抗地gāo辛抗體10μl)，混勻后 50μl/片加至標(biāo)本片上。置樣品于濕盒中，37℃反應(yīng)30分鐘。
0.01M TBS洗2分鐘×3次。
7．用抗體稀釋液 1：100 稀釋 SABC：取 1ml 抗體稀釋液加 SABC 10μl，混勻后 50μl/片加至切片。37℃反應(yīng) 30分鐘。0.01M TBS洗5分鐘×4次。
8．必要時可用DAPI染色液輕度復(fù)染，蒸餾水洗。抗熒光衰減封片劑封片(可用甘油代替)。熒光顯微鏡觀察。
結(jié)果判定：
細(xì)胞核中有黃綠色顆粒者為陽性細(xì)胞，即凋亡的細(xì)胞。
注意事項(xiàng)：
1．試劑盒嚴(yán)格-20℃存放。
2．初用時如試管底部無可見的試劑，在離心機(jī)離心5分鐘，使試劑沉至管底。
3．檢測過程中切勿使樣品干涸。

根據(jù)您的關(guān)注的細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)，細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)，F(xiàn)ITC，細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III，ZN1526，百奧萊博，，，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN140634	MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒	500次
YT126	細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)	100次|500次
YT141	Caspase 4 活性檢測試劑盒	20次|100次
YT149	羅丹明123	5mg
YT158	細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)	5mg
SNM513	Caspase-3活性檢測試劑盒(分光光度法)	100T|50T|20T

關(guān)注細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)，細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)，F(xiàn)ITC，細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III，ZN1526，百奧萊博，，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：Caspase 1 活性檢測試劑盒
貨號：YT138
規(guī)格：20次|100次
本試劑盒是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中caspase 1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時，除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測20個樣品。

試劑盒組分：
裂解液——————8ml
檢測緩沖液——————8ml
Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl

Caspase是一個在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也稱interkeukin 1b conberting enzyme(ICE)，有時被寫作caspase-1或caspase 1，是caspase家族中可以剪切IL-1b前體蛋白或IL-18前體產(chǎn)生相應(yīng)成熟的細(xì)胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前體蛋白，產(chǎn)生20kD和10kD的片段，這兩個片段可以形成異源二聚體(heterodimer)，并進(jìn)一步由兩個異源二聚體形成四聚體。Caspase 1可以通過剪切其凋亡Bcl-XL來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并通過其對一些細(xì)胞因子前體的剪切來調(diào)控相關(guān)免疫反應(yīng)。

本caspase 1活性檢測試劑盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 1的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。

試劑盒中提供了caspase 1催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA，可以作為定量caspase 1酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。

注意事項(xiàng)：

1. 須自備可以測定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過100μl的分光光度檢測杯及相應(yīng)分光光度計。優(yōu)先考慮測定A405，如有困難可以測定A400。
2. Ac-YVAD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融，請注意適當(dāng)分裝。
3. 測定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測定試劑盒(YT034)，可向百奧萊博訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測定蛋白濃度，以降低DTT對蛋白濃度測定的干擾。
4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒，請注意小心防護(hù)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它c(diǎn)aspase活性檢測試劑盒的裂解液通用，即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它c(diǎn)aspase活性檢測試劑盒的檢測。

儲存條件：-20℃。

如果您覺得“ZN1526 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒III”描述資料不夠齊全，請聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時請告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁鏈接：http://www.lgsztm.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8512839.html
已經(jīng)有950位訪客查看了本頁.