BTN11-2371 牛腺病毒3型PCR檢測試劑盒

產品簡介
牛腺病毒3型PCR檢測試劑盒(熒光定量法)由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學研究方面,我公司專注于病毒PCR檢測試劑盒產品的研發、生產和供應,為您提供的牛腺病毒3型PCR檢測試劑盒(熒光定量法)質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括牛腺病毒3型PCR檢測試劑盒(熒光定量法)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:牛腺病毒3型PCR檢測試劑盒(熒光定量法)
英文名稱:Bovine Adenovirus Type 3 qPCR Kit
產品貨號:BTN11-2371
產品規格:50次
本產品是根據BAV-3核酸序列的保守區pol蛋白酶設計引物,定制的一種檢測BAV-3的熒光定量PCR試劑盒。牛血清的質量控制標準中有一項重要的指標是病毒的檢測。比較常見的易感染奶牛和肉牛的病毒如DNA病毒:牛腺病毒3型(Bobine Adenovirus Type 3,BAV-3),主要引起牛的呼吸道和腸道疾病,其主要特征為肺炎、腸炎、結膜炎和多發性關節炎,是犢牛死亡的重要原因之一。其易感和潛伏性給畜牧業及其貿易帶來嚴重的經濟損失,同時,給細胞培養以及相關基礎研究帶來一定的問題。因此,病毒的快速檢測是控制牛血清質量的前提,除了傳統的培養傳代觀察細胞病變,血清學診斷技術外,我們在這里引入熒光定量PCR的方法,來快速檢測血清樣品中是否污染有BAV-3。
產品特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板即可使用。
2. 快捷,整個PCR過程只要一小時。
3. 靈敏度達達100copies/reactlon水平。
4. 熒光PCR mix中含第二代飽和型熒光染料,效果好于SYBR Green I。
5. 密封體系,大降低了假陽性。
6. 本產品跟各種熒光PCR儀器兼容。
產品組成:
| 組分 | 編號 | 規格(50T) |
| 2×熒光PCR Mix | BTN90408 | 1.5mL |
| BAV-3專一性引物一 | yw1277 | 100uL |
| BAV-3專一性引物二 | yw1278 | 100uL |
| BAV-3標準品1.27×10E11拷貝/uL) | yw12791280 | 40uL |
| DNA稀釋液 | BTN121206-10 | 10mL |
| 超純水 | BTN100935 | 1mL |
保存條件:-20℃保存,有效期一年。
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規格:48次/盒
人類細小病毒B19是英國科學家Cossart及其同事于1977年在篩查無癥狀乙肝患者血清時無意發現的,根據生化及分子生物學特點將其歸為細小病毒科。由于其是在B組的第19號樣品中發現的,故命名為B19病毒。zuì初人們認為B19是人群中普遍存在而不致病的一種病毒,但后來發現,B19感染是引起傳染性紅斑、慢性溶血性貧血患者發生再障危象、免疫抑制患者慢性貧血、孕期流產、死胎的病原體。
本試劑盒適用于檢測人全血等標本中的人細小病毒(B19)DNA,適用于人細小病毒(B19)感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。
【檢驗原理】
本試劑盒用一對人細小病毒B19特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光PCR技術對人細小病毒B19核酸進行體外擴增檢測,用于對可疑感染者的病原學診斷。
【試劑組成】
名稱 數量 規格
核酸提取液 2管 1.5ml
酶液 1管 50μl
B19反應液 1管 1.0ml
B19陽性質控品 1管 50μl
陰性質控品 1管 250μl
說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
【儲存條件及有效期】
-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融,有效期12個月。
【適用儀器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【標本采集】
1. 適用標本類型:人全血;
2. 標本采集:
血液:無菌注射器抽取外周血1-2ml注入EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管;
【保存和運輸】
上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過6個月,標本運送應采用0℃冰壺。
【使用方法】
1. 樣品處理(樣本處理區)
1.1 樣本前處理
取抗凝血下層(細胞層)50μl,加入200μl ddH2O使其脹破。
1.2 DNA提取
1) 取上述處理好的標本40μl,加入等體積核酸提取液,100℃恒溫處理10分鐘,13000 rpm離心5分鐘,取上清液轉移至新的1.5ml EP管,-20℃保存;
2) DNA的提取也可以采用北京百奧萊博科技有限公司生產的DNA提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
2. 試劑配制(試劑準備區)
根據待檢測樣本總數,設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1
管陰性對照+1管陽性對照),每測試反應體系配制如下表:
試劑 B19 反應液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加樣(樣本處理區)
將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl,加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
4. PCR擴增(核酸擴增區)
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內;
4.2 推薦循環參數設置:
步驟 循環數 溫度 時間 收集熒光信號
1 1 cycle 94℃ 2min 否
2 40 cycle 94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
反應體系為25ul;熒光通道檢測選擇:FAM通道。
5. 結果分析判定
5.1 結果分析條件設定
1) 設置基線(ba
2) 設置閾值(threshold):以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線(無規則的噪音線)的zuì高點。
5.2 結果判斷
1) 陽性:檢測樣本Ct值小于等于35.0,且曲線有明顯的指數增長期;
2) 可疑:檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0,重復一次實驗,如果Ct值仍小于40.0,且曲線有明顯的指數增長期,為陽性,否則為陰性;
3) 陰性:檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結果的解析
實驗室環境污染,試劑污染,標本交叉污染會出現假陽性結果;試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果。
7. 質控標準
1) 陰性質控品:擴增曲線無對數生長期或無Ct值顯示;
2) 陽性質控品:擴增曲線有明顯對數生長期,且Ct值≤32;
以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
【注意事項】
1. 所有操作嚴格按照說明書進行;
2. 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;
3. 反應液應避光保存;
4. 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5. 使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服;
6. 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染;
7. 實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8. 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。

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